抗體（ antibody，Ab）是機體 B淋巴細胞受到抗原刺激後所產生的特異性球蛋白，故亦稱為免疫球蛋白。機體初次接觸抗原後，激發機體產生的特異性抗體親和力低、持續時間短；而當同一抗原再次刺激機體後，則能產生高親和力、高效價、持續時間長的抗體。由於抗體能與相應的抗原發生特異性結合反應，因此特異性抗體是免疫學實驗中常用的試劑，不僅對於抗原的分析鋻定和定量檢測極為重要，而且廣泛應用於臨床疾病的診斷、治療和預防中。在免疫學檢測中應用的主要抗體是多克隆抗體和單克隆抗體，多克隆抗體常用免疫動物的方法獲得，而單克隆抗體則采用雜交瘤技術制備。本章主要介紹這兩種抗體的制備方法。
實驗一多克隆抗體的制備
多克隆抗體（ polyclonal antibody）是機體針對抗原的不同表位所產生的抗體混合物。是用制備的純化免疫原按照一定的免疫程序接種給所選擇的動物，在含有多種抗原表位的抗原刺激下，該動物體內多個 B細胞克隆被激活並產生針對這種抗原多種不同表位的抗體混合物。含有這些特異性抗體的動物血清稱為免疫血清或抗血清，而從免疫血清中純化的免疫球蛋白則稱為抗體。
一、抗體制備的流程
優質免疫血清的產生，主要取決於抗原的純度和免疫原性，動物的應答能力以及免疫程序（如免疫途徑、抗原劑量、注射次數、時間間隔、有無佐劑等因素）。
因此制備高質量的抗體必須具備理想的免疫原、適宜的動物和切實可行的免疫方案。
（一）免疫動物的選擇
免疫用的動物主要為哺乳動物和禽類，常選擇家兔、綿羊、豚鼠及小鼠等。選擇動物要依據抗體制備的條件而定。
1．
抗原與動物的種繫抗原的來源與免疫動物之間種繫關繫越遠，其抗原免疫原性越強，越易產生免疫應答；反之，種繫關繫越近，則抗原免疫原性越弱。如用雞球蛋白免疫親緣關繫較近的鴨或鵝，則免疫原性較差。
2．動物的個體狀況
動物的年齡與健康狀況可影響產生抗體的效價，年齡太小者易產生免疫耐受，而年老體衰者免疫應答能力低下，不易產生高效價的抗體。所以用於制備抗血清的動物必須是適齡、健壯、體重合乎一定要求的健康動物。免疫過程中應特別注意營養和衛生管理。
3．
抗體的用量和要求動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定。制備量大的抗體常選擇羊、馬等大動物；如所需抗體的量少，宜用小動物，如家兔、豚鼠等。對蛋白質抗原大部分動物均適合，常用家兔和山羊。制備供補體試驗用的抗體可選擇豚鼠。
（二）免疫方案
不同的抗原，其免疫原性的強弱不一，這取決於抗原的分子量、化學活性基團、立體結構、物理形狀和彌散速度等。在免疫動物時應考慮免疫原的劑量、免疫途徑、次數和免疫間隔時間等因素對免疫效果的影響。
1．免疫原的劑量
抗原的免疫劑量依照給予抗原的種類、注射途徑、免疫次數以及受體動物的種類、免疫周期及所要求的抗體特性等而不同。免疫原劑量過大或過小都易引起免疫耐受。在中間劑量範圍內，免疫原劑量適當加大，時間間隔延長，可產生較高效價的抗體。一般而言，小鼠首次免疫劑量為每次 50～400μg，大鼠為每次 100μg～1mg，兔為每次 200μg～1mg。加強免疫劑量為首次劑量的 1/5～2/5。如要制備高度特異性的抗血清，可選用低劑量抗原短程免疫法；如欲獲得高效價的抗血清，則宜采用大劑量抗原長程免疫法。
