前言

隨著寵物行業的發展，顯微鏡檢驗技術已在寵物臨床廣泛應用，並成為寵物疾病診斷的必備基礎技術之一。不同於其他依靠機器判讀的實驗室檢查，顯微鏡檢驗對於檢驗人員的要求很高，檢驗人員的理論知識和經驗積累程度將直接影響結果的度，而這一步影響到臨床的方向和結果。目前關於寵物臨床病例樣品的顯微鏡檢測圖譜方面的資料仍然較為匱乏。

我們通過對大量臨床病例的顯微鏡檢測圖譜的歸類、整理，於2006年編撰出版了《寵物臨床顯微檢驗及圖譜》，填補了國內這方面的空白。該書自出版今，得到了廣大讀者的認可，部分教學單位將其作為臨床實驗室檢驗的教學參考書。隨著寵物飼養量的增加、寵物疾病的多樣化和復雜化，以及實驗室檢驗技術的不斷發展，獸醫臨床人員對實驗室顯微鏡檢驗知識的需求也在增長。該書對部分技術操作的描述已顯簡略，部分目前常見的顯微鏡檢驗圖片也存在欠缺。應讀者需求，我們對該書內行補充完善，予以修訂再版，以期更好地服務廣大獸醫臨床工作者。

第二版仍以寵物臨床實驗室檢驗中的顯微鏡檢驗為主，對相關樣品的檢驗操作步驟的描行了細化，並新增100餘幅顯微鏡檢驗圖片。全書仍分為六章，章介紹了顯微鏡的使用、各種檢驗標本的取樣及鏡檢的基本操作和技術要點，較上一版加強了顯微鏡維護、不同抗凝劑性能特點方面的描述，並細化了血、尿、脫落細胞等樣品采集的操作；第二章主要對比介紹了犬、貓、豬、兔、鼠、禽的血液細胞形態及常見的異常形態，新增了影紅細胞、角膜紅細胞、海因茨小體、豪喬氏小體等紅細胞異常情況，以及巴貝斯蟲、肝簇蟲等血液寄生蟲的文字介紹和圖像資料；第三章介紹了尿沉渣的檢查，新增了胱氨酸、重尿酸氨、碳酸鈣、磷酸銨鎂等結晶的圖像及臨床意義；第四章介紹了糞便中常見的消化產物、寄生蟲及蟲卵、易與蟲卵混淆的物體，新增了部分腸道寄生蟲的圖像及描述；第五章介紹了寵物皮膚感染的主要病原體括常見體表寄生蟲、細菌及真菌等，新增了姬螯螨、毛發結構、毛發生長狀態判斷等的圖片資料和較細致的介紹，修正了上一版中對毛發色素顆粒的認識；第六章主要介紹了皮膚、體腔液及塗片中的脫落細胞，新增了來自皮脂腺瘤、肛周腺瘤、基底細胞瘤、鱗狀上皮細胞癌、脂肪瘤、黑色素瘤、漿細胞瘤、肥大細胞瘤，以及嗜酸性炎、肉芽腫性炎等的脫落細胞圖像等。

本書中的放大倍率以物鏡與目鏡放大倍率的乘積表示，如“100×”即為10倍物鏡下之所見。為較清晰地表現被攝物的細節，拍攝中常使用相機的光學能，此時的放大倍率以物鏡與目鏡放大倍率的乘積再乘光學變焦倍數表示，如“100×5”，即為10倍物鏡加5倍光學變焦之所見。

本次修訂提供了較版更豐富的內容，希望繼續成為廣大獸醫臨床工作者、獸醫專業學生及寵物飼養者的參考書籍。

由於所限，加之時間較緊，書中難免存在不妥之處，希望廣大讀者閱讀後批評指正，以期將來繼續修訂再版。


編者

2021年5月



版前言

當前，隨著寵物飼養量的增加，寵物門診越來越成為獸療工作的重要內容。

正確診斷是制定合理的方案的前提，是一切臨床工作的基礎。實驗室檢驗是寵物疾病診斷的有效手段，有時甚是確診的依據。實驗室檢驗的技術對診斷的正確性有比較關鍵的作用。

目前的獸醫教育，仍以馬、牛、豬、雞等傳統動物的疾病診治為主要教學內容，很少涉及寵物疾病；相關的診斷學課程，也多以大家畜為實驗動物，對寵物疾病實驗室檢驗技術的介紹很不足。因此，實驗室檢驗技術成為制約寵物臨床診療的關鍵問題之一。

顯微鏡是寵物臨床實驗室要的工具，顯微鏡檢驗也是實驗室檢驗中工作量的項目，它要求工作人員掌握一定的觀察檢驗和操作技巧。一般的臨床檢查主要是通過感官直接觀察動物的宏觀狀態；而通過顯微鏡檢驗動物的血、糞、尿、皮樣、脫落細胞等組織樣品，可以看作是對動物疾病微觀癥狀的觀察，可為疾病的診斷提一步的依據。顯微鏡檢驗是一項操作性很強的工作，相關的內容很難以單純的文字形式表述，檢驗學圖譜便成為重要的參考工具。

本書以介紹寵物門診實驗室檢驗中的顯微鏡檢驗為主。章介紹了顯微鏡檢驗的使用、各種檢驗標本的取樣和顯微鏡檢驗（簡稱鏡檢）的基本操作，讀者應注意不同標本的取樣及鏡檢的操作技巧；第二章主要對比介紹了犬、貓、豬、兔、鼠、禽的血液細胞形態，讀者應注意分辨不同寵物血細胞的特點，防止誤判；第三章介紹了尿沉渣的形態學檢驗，讀者可注意泌尿繫統不同層次脫落上皮的形態比較；第四章介紹了糞便中常見的消化產物、寄生蟲及蟲卵、易與蟲卵混淆物，讀者主要鋻別各種寄生蟲及蟲卵的形態特征；第五章介紹了寵物皮膚感染的主要病原體；第六章主要介紹了體腔液中的脫落細胞，讀者應注意鋻別惡變細胞的特征。

本書中圖片的拍攝，全部使用數碼相機。圖片基本忠實於鏡下所見的真實色彩，以利讀者在工作中鋻別。為便於讀者鋻別目標物的尺，拍攝時全部選用10倍目鏡。對部分檢驗，本書提供了同類型樣品不同放大倍率下的圖像。圖譜的放大倍率以物鏡與目鏡放大倍率的乘積表示，如“100×”，即為10倍物鏡下之所見。為較清晰地表現被攝物的細節，拍攝中常使用相機的光學能，此時的放大倍率以物鏡與目鏡放大倍率的乘積再乘光學變焦倍數表示，如“100×5”，即為10倍物鏡加5倍光學變焦之所見。

在實際的檢驗工作中，讀者可參考本書提供的方法，主要保存各種典型或罕見病例的病料樣品；對難以保存的病料，也可照相留取資料，以便日後交流研究。在目前數碼相機普及的條件下，通過簡單的非專業顯微照相手段，如用適當的非專業數碼相機直接對準顯微鏡目鏡照相，有時也可獲得質量較好的照片。據此，讀者也可建立起自己的實驗室檢驗圖譜。

本書可作為動物臨床檢驗工作的入門書籍，以及非專業愛好者、寵物養殖業者的自學參考。關於實驗室檢驗的各項指標的正常值、診斷意義，以及相關疾病的方法等，讀者尚需參考相關教材。


編者

2006年5月

章 基本操作

臨床檢查主要是通過感官直接觀察動物宏觀的癥狀，而對動物的組織和排洩物樣品等，還可行實驗室檢驗。實驗室檢驗是診斷疾病的重要手段，有時甚至是確診的依據。實驗室檢驗的技術對診斷的正確性有比較關鍵的作用。

檢驗室應設在安靜、干燥、清潔、通風良好的專用房屋內，室內應有上下水和足夠的照明設施。如在北方地區，還應嚴格注意防塵。

寵物門診檢驗室基本的裝備主括：普通生物顯微鏡、血細胞計數板、計數器、白細胞分類計數器、微量加樣器、離心機、稱量設備(、量筒等)、酒精燈、冰箱。另外，還需購入載玻片、蓋玻片、一次性塑料吸管和試管、染料和其他化學試劑、試紙等耗材。

具備了上述條件，就可以開展寵物疾病的基本的實驗室檢驗了。應用這些設備，可行血液學常規檢查、糞便和尿沉渣檢查、皮膚科檢查及各種脫落細胞的檢查。

需要注意的是，雖然寵物臨床檢驗室處理的多數病例實際並非人畜共患病，但仍必須注意生物防護問題。所有生物樣本括血液或其他組織、體液等均應視為具有潛在生物風險的樣本來處理。應注意檢驗室工作人員的個人衛生及防護，保持穿著合規的實驗服，佩戴手套，不應披散長發，不宜穿著暴露皮膚的拖鞋：若皮膚意外接觸病料後應盡快清洗消毒。檢驗所用器械和工作區域應定期消毒，檢驗室內應禁止飲食或存放食物，廢棄的尖銳物均應置於利器盒內。

節 顯微鏡及操作的注意事項

顯微鏡是實驗室中重要的設備。了解顯微鏡的工作原理、使用操作與維護，可提高檢查結果的可靠性，延長設備的壽命。

目前常用的普通生物顯微鏡，目鏡多為10倍，物鏡一括4倍、10倍、40倍、100倍(油鏡)。對不同的檢驗目標，應選用恰當的物鏡。在觀察玻片時，應先使用低倍鏡(4×或IOX物鏡)

使用低倍物鏡時，應適當調暗光源、縮小光圈，尤其應注意將聚光鏡位置降低，以得到較大的對比度；在使用高倍物鏡觀察時，宜適當調亮光源，使光圈開放較大，將聚光鏡升到較高位置，以獲得較明亮的視野。

顯微鏡使用結束，如短時間內再次使用，可將其光源調至暗；若短時間內不再使用，需將光源關閉。

欲使用油鏡時，應先將鏡頭油(即香柏油，為一種樹脂)滴在被觀察的玻片上，再將玻片置於載物臺上。如在載物臺上裝置好玻片後再滴油，操作過程中易使鏡頭油污染顯微鏡。油鏡使用後，當贏即用擦鏡頭紙擦去鏡頭上的油滴，然後用擦鏡頭紙蘸擦鏡液(乙醚：無水乙醇=pan>：pan>，或二甲苯)再擦拭，以除去殘存的油污。如油鏡的視野變得模糊，多數情況下是由於上次使用後未擦淨的鏡頭油固化於鏡頭表面所致。此時應旋下油鏡，蘸擦鏡液認真擦洗鏡片表面，但萬不可拆開油鏡鏡片組或將油鏡浸泡於擦鏡液中。

恰當的維護將有利於顯微鏡保持良好的性能。應為顯微鏡配備保護罩，在閑置時可有效隔離灰塵等污染物(注意，當光源點亮時，不可在顯微鏡上罩防塵罩)。應定期用擦鏡紙蘸取擦鏡液清除鏡頭、載物臺上沾染的指紋等污跡；擦拭鏡頭必須用專用擦鏡紙，不可用其他紙張或布料代替，且擦鏡紙必須防塵保存。存放顯微鏡時，應以4×物鏡對準觀察光路，並將載物臺降到低點，以保持載物臺和物鏡之間的距離，從而降低意外損壞物鏡的可能性。另外，應盡量保持光路繫統的密閉狀態，不宜頻繁拆換鏡頭。

無特殊原因，非專業維修人員不宜拆卸顯微鏡。當常規維護、保養不能保持顯微鏡良好性能時，應考慮專業的清洗和保養。

第二節 血液檢查的基本操作

血液檢查的內容很多，操作時可采取人工法或自動分析儀。由於不同動物血液細胞的尺等差異較大，如非專用於動物的分析儀，不宜作獸醫實驗室檢驗之用。就目前情況看，即使可用於獸醫檢驗的自動分析儀，在作白細胞分類計數項目時仍有很大的誤差，而且自動分析儀的使用成本較高，所以，血液學常規檢查的顯微鏡人工汁數仍顯得重要。

本書介紹了血常規檢驗中顯微鏡操作的項目括紅、白細胞的計數和形態學檢驗。上述檢驗項目，有被檢動物健康時的基礎值作對照，或在疾病過程中做到連續監測，這樣纔能更好地判斷當前病情和預後。

經過一定時間的練醫檢驗員應可在20～30分鐘內完成一個樣本上述三項指標的測定。

1.血液樣本的采集和保存

正確的血液樣本采集方法是血液學檢測的前提。采血技術員首先應該確認所行檢測的項目，根據項目類型確定適當的采血器具和采血部位。不適當地采集和處理樣本，會影響檢測結果的可靠性，甚至誤導臨床獸醫的判斷。

不同的動物，其便於采血的部位不同(圖pan>—pan>一圖pan>—6)。中等體型的犬，可在前肢臂頭靜脈、後肢的跖背側靜脈、隱外側靜脈：貓和體型較小的犬，可在頸靜脈、後肢內側的隱靜脈采血；豬、兔可在耳背的耳緣靜脈采血；長尾的鼠，可在尾背側的尾靜脈采血。

采血前，可適當剪除采血區域的毛發；對毛發較長、較軟的動物，也可用酒精棉打濕局部後分開被毛，暴露血管部位。在清潔、消毒采血部位的過程中，操作人員應該避免過度擠壓周圍組織，以防組織損傷。除頸靜脈采血外，一般采血前均使用止血帶壓迫被采血靜脈心端，使靜脈充盈而可見，然後將采血針頭刺入血管並采集血液；若采血針頭刺

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