作 者:柳志強 主編
定 價:20
出 版 社:中國輕工業出版社
出版日期:2017年07月01日
頁 數:102
裝 幀:平裝
ISBN:9787518414536
●第一章瓊脂糖凝膠電泳
●一、實驗材料
●二、實驗儀器
●三、操作步驟
●四、技術要點
●第二章基因組DNA的提取
●一、從植物組織提取基因組DNA
●二、從動物組織提取基因組DNA
●三、細菌基因組DNA的制備
●四、絲狀真菌基因組DNA的制備
●五、酵母基因組DNA的制備
●六、基因組DNA的檢測
●第三章RNA的提取和cDNA合成
●一、動植物組織mRNA提取
●二、植物病毒RNA提取
●三、絲狀真菌RNA提取
●四、細菌RNA提取
●五、酵母RNA提取
●六、cDNA的合成
●第四章聚合酶鏈反應(PCR)
●部分目錄
本書共包括十四章,包括微生物核酸提取,聚合酶鏈反應,載體連接轉化,大腸杆菌表達,分子雜交,DNA和蛋白質相互作用等目前分子微生物學領域常用的實驗技術,章節順序安排基本參照常規實驗的流程。每個章節在概述部分對實驗原理進行了詳細闡述,便於讀者對實驗步驟的理解;在實驗步驟中,結合前人經驗總結了部分注意事項,可供廣大讀者進行參考;每章結尾均有思考題,可用於實驗的復習和加深理解;書末還附錄有本書所涉及的質粒圖譜及微生物常用培養基配方,可供讀者參考。
柳志強 主編
柳志強,男。海南大學環境與植物保護學院副教授,研究方向為微生物天然產物分離與應用;植物病害生物防治;微生物功能基因。
瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳是分離鋻定和純化DN 段的標準方法。該技術操作簡便快速,可以分辨用其他方法(如密度梯度離心法)所無法分離的DN 段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙錠(Ethidium bromide, EB染色),在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DN 段在凝膠中的位置。此外,還可以從電泳後的凝膠中回收特定的DNA條帶,用於以後的隆操作。
瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離 DN 度的範圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至50kb的DNA 片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和方向恆定的電場下電泳。聚丙烯酰胺分離小片段DNA(5-500bp)效果較好,其分辯力極高,等