●緒論 1
第一節 醫學基礎研究技術的主要內容 1
第二節 醫學基礎研究技術的發展簡史 3
第一篇 分子生物學技術及應用
第一章 核酸的制備及質量鋻定方法 6
第一節 DNA的分離純化 7
第二節 組織細胞總RNA的提取 9
第三節 核酸的定性定量與鋻定分析 11
實驗1.1 真核組織/細胞基因組DNA提取及鋻定 15
實驗1.2 TRIzol試劑法提取組織細胞總RNA及鋻定 19
第二章 核酸結構與功能研究的分析技術 22
第一節 核酸分子雜交、DNA芯片技術與DNA測序 22
第二節 聚合酶鏈反應與定點誘變 26
第三節 基因結構研究的技術策略 32
第四節 基因表達與功能研究的技術策略 36
第五節 表觀遺傳學研究技術 44
實驗2.1 PCR擴增目的基因 48
實驗2.2 實時熒光定量PCR分析目的基因mRNA表達水平 49
第三章 蛋白質的分離純化與分析技術 52
第一節 蛋白質的分離純化與鋻定技術 52
第二節 蛋白質的結構與功能分析技術 64
第三節 蛋白質組學研究與新技術應用 72
實驗3.1 血清白蛋白、γ球蛋白的分離純化與鋻定 78
實驗3.2 蛋白質印跡法對組織中特定蛋白質的定性定量分析 81
實驗3.3 蛋白質的雙向電泳 84
實驗3.4 免疫共沉澱檢測蛋白質 -蛋白質相互作用 87
第四章 酶學研究技術 89
第一節 酶的基本研究方法 89
第二節 酶法分析 91
第三節 酶在醫學上的應用 93
實驗4.1 乳酸脫氫酶的活性測定及組織同工酶譜分析 95
實驗4.2 堿性磷酸酶的分離純化及酶的比活性測定 98
實驗4.3 酶法分析對特定物質的定量分析 101
第五章 基因工程 104
第一節 基因工程的技術路線 104
第二節 基因工程技術與醫學發展 111
實驗5.1 目的基因cDNA重組質粒的分子克隆 114
實驗5.2 工程菌外源融合蛋白的誘導表達、分離純化及鋻定 120
第二篇 細胞培養技術及應用
第六章 細胞培養基本技術 123
第一節 細胞培養的基本條件 123
第二節 培養細胞的基本技術 134
第三節 細胞共培養 141
實驗6.1 小鼠腹腔巨噬細胞的原代培養 143
實驗6.2 HepG2肝細胞繫的傳代培養 144
第七章 培養細胞的活性與細胞功能檢測技術 146
第一節 培養細胞的形態學觀察 146
第二節 培養細胞的生長與增殖特點148
第三節 培養細胞的檢測分析技術 151
實驗7.1 MTT法檢測細胞增殖與活性狀態 156
實驗7.2 流式細胞術檢測細胞凋亡 157
實驗7.3 HepG2肝細胞轉染EGFPCD36及CD36定位觀察 158
第八章 干細胞與干細胞培養 161
第一節 干細胞的分類與特點 161
第二節 干細胞的分離培養與鋻定 163
第三節 干細胞的分化誘導 165
第四節 干細胞在醫學中的應用 167
實驗8.1 鼠源性干細胞的分離與培養 168
第九章 細胞工程 170
第一節 細胞工程的研究基本技術 170
第二節 細胞工程的醫學應用 176
第三篇 現代組織形態學研究技術及應用
第十章 組織制片技術 178
第一節 組織制片技術的種類 178
第二節 組織制片的基本流程 180
第三節 組織學特殊標本的制作 190
實驗10.1 HE染色觀察組織細胞形態 199
第十一章 組織化學和細胞化學技術 201
第一節 酶類的組織化學技術 201
第二節 脂質的組織化學技術 204
第三節 多糖類的組織化學技術 206
第四節 核酸的組織化學技術 207
實驗11.1 油紅O染色觀察組織細胞脂質分布 209
第十二章 免疫組織化學技術 210
第一節 免疫組織化學技術的原理與分類 210
第二節 免疫組織化學技術的基本條件 215
第三節 免疫組織化學技術的基本流程 218
第四節 免疫組織化學結果分析及其應用 220
實驗12.1 S-P法檢測裸鼠大腸癌組織中細胞靶分子的表達 226
第十三章 組織形態學的分析技術 228
第一節 顯微鏡技術 228
第二節 組織學研究的定量分析技術 232
參考文獻 236
索引 237
彩圖
《醫學基礎研究技術》繫統性介紹了分子生物學、細胞培養與現代組織形態學的基本技術與研究方法,強調整合性實驗技術指導的基本風格和主要內容。《醫學基礎研究技術》以“分子—細胞—組織”的順序,按學科特點分為三篇,共十三章內容。第一篇從分子水平重點介紹核酸、蛋白質的分離純化與分析技術、酶學研究技術,以及基因工程;第二篇從細胞水平主要介紹細胞培養基本技術、培養細胞的活性與細胞功能檢測技術、干細胞與干細胞培養及細胞工程;第三篇介紹現代組織形態學研究技術及應用,包括組織制片、組織化學和細胞化學與免疫組織化學技術及組織形態學的分析技術及其應用。以全面培養研究生創新性思維與實踐技能為目標,每篇均引入基礎性、實用性、代表性的經典實驗方案及操作要點分析。《醫學基礎研究技術》立足基礎研究、跟蹤優選技術新進展,語言流暢、條理清晰、圖文並茂。