●第一部分 基因工程原理篇
第1章 緒論
1.1 基因學說與基因的現代概念
1.1.1 經典遺傳學階段的基因學說
1.1.2 分子遺傳學階段的基因學說
1.1.3 現代的基因學說
1.2 基因工程的誕生與發展
1.3 基因工程的研究內容
1.4 基因工程應用概況
1.4.1 基因工程在工業上的應用
1.4.2 基因工程在農業上的應用
1.4.3 基因工程在醫學上的應用
1.4.4 基因工程在軍事和國防上的應用
第2章 基因工程的工具酶
2.1 核酸酶
2.1.1 性核酸內切酶
2.1.2 非性核酸酶
2.2 聚合酶
2.2.1 DNA聚合酶
2.2.2 RNA聚合酶
2.2.3 末端轉移酶
2.3 DNA連接酶
2.4 修飾酶
第3章 基因工程載體
3.1 質粒載體
3.1.1 質粒載體的生物學特性
3.1.2 質粒載體的發展
3.1.3 常見的質粒載體
3.2 噬菌體載體
3.2.1 噬菌體的生物學特性
3.2.2 常見噬菌體載體
3.2.3 噬菌粒和柯斯質粒
3.3 人工染色體載體
3.4 其他載體
第4章 DNA的連接、轉化和重組子篩選
4.1 DNA的連接
4.2 DNA分子導入受體細胞
4.3 重組子的篩選與鋻定
4.3.1 重組子的初步篩選
4.3.2 重組子的進一步篩選
第5章 基因工程技術與方法
5.1 核酸的分離純化
5.1.1 DNA的分離純化
5.1.2 RNA的分離純化
5.2 凝膠電泳技術
5.2.1 瓊脂糖凝膠電泳
5.2.2 聚丙烯酰胺凝膠電泳
5.2.3 脈衝電場凝膠電泳
5.3 PCR技術
5.3.1 PCR的基本原理
5.3.2 未知序列DN 段的PCR
5.3.3 反轉錄PCR
5.3.4 差異顯示PCR
5.3.5 實時定量PCR
5.4 探針標記技術
5.4.1 放射性探針標記
5.4.2 非放射性標記
5.5 分子雜交技術
5.6 DNA測序技術
5.6.1 第一代測序技術
5.6.2 新一代測序技術
5.7 DNA定點突變與基因編輯技術
5.7.1 基因編輯技術概述
5.7.2 CRISPR／Cas9基因編輯技術
5.7.3 基因編輯突變的檢測
5.8 抑制縮減雜交技術
5.9 基因芯片技術
5.10 分子標記技術
5.10.1 遺傳標記的類型
5.10.2 RFLP標記
5.10.3 RAPD標記
5.10.4 AFLP標記
5.10.5 SSR標記
5.10.6 SNP標記
5.10.7 其他類型分子標記
5.10.8 分子標記在植物分子育種中的應用
5.11 目的基因的分離技術
5.11.1 化學合成法
5.11.2 基因文庫法
5.11.3 PCR法
5.11.4 圖位克隆法
5.11.5 DNA標簽法
5.11.6 基於RNA差異表達的分離方法
5.12 外源基因表達技術
5.12.1 基因表達的分子生物學基礎
5.12.2 外源基因在大腸杆菌中的表達
5.12.3 外源基因在酵母中的表達
5.12.4 外源基因在哺乳動物細胞中的表達
5.12.5 外源基因在植物細胞中的表達
5.12.6 外源基因表達產物的檢測與純化
第6章 基因工程在農業作物上的應用
6.1 基因工程技術在農業上的應用
6.1.1 培育轉基因作物
6.1.2 改進常規育種
6.1.3 分子育種
6.2 基因工程技術在育種上的應用
6.2.1 提高光合作用效率
6.2.2 固氮基因的利用
6.2.3 作物品質改良
6.2.4 增加次生代謝物的產率
6.2.5 增強作物抗病蟲害的能力
6.2.6 增強作物的抗除草劑的能力
6.3 植物基因工程產品的安全性問題
第二部分 基因工程實驗篇
實驗一 堿裂解法抽提質粒DNA
實驗二 瓊脂糖凝膠電泳
實驗三 DNA濃度測定與酶切反應
實驗四 目的片段的回收
實驗五 DNA的體外連接
實驗六 重組DNA的轉化
實驗七 重組轉化子的快速鋻定
實驗八 聚合酶鏈式反應(PCR)
實驗九 植物基因組DNA提取
實驗十 Southern雜交
實驗十一 植物總RNA提取
實驗十二 RNA質量的檢測
實驗十三 Northern雜交
實驗十四 反轉錄PCR(RT-PCR)
實驗十五 外源基因在原核生物細菌中的表達
實驗十六 外源基因在真核生物畢赤酵母中的表達
實驗十七 外源基因在無細胞表達繫統麥胚提取物中的表達
實驗十八 Western雜交
實驗十九 微衛星(SSR)標記分析
綜合性設計性實驗一 重組子鋻定方法探索
綜合性設計性實驗二 大腸杆菌DNA轉化方法探索
綜合性設計性實驗三 大豆轉基因成分檢測
綜合性設計性實驗四 大米轉基因成分檢測
附錄Ⅰ 溶液配方
附錄Ⅱ 常用器皿的清洗
附錄Ⅲ 實驗所用引物
附錄Ⅳ 移液器使用與維護
附錄Ⅴ 實驗守則
參考文獻

本書包括基因工程原理篇和基因工程實驗篇兩部分內容。基因工程原理篇闡述了基因工程原理與技術，其內容包括緒論、基因工程的工具酶和基因工程載體、DNA的連接、轉化和重組子篩選等基因工程相關的基本原理和新發展以及基因工程技術與方法、基因工程在農業作物上的應用。同時，基因工程也是一門實踐性很強的學科，為了增強本書的實操性，在基因工程實驗篇，編者結合自身的科研實踐經驗以及農林生物類研究人員的實際需要，整理並收錄了編者所在教研室歷年來為本校師生及相關研究人員開出的各種基因工程實用性實驗。 期望讀者既能從本書的原理中獲得基因工程的相關理論和技術知識，又能從本書的實驗中獲得指導和參考依據，並能將相關的理論和技術直接應用到科研中，以此為迅速開展研究奠定牢固的理論和實踐基礎。