目錄
前言
篇 生物化學與分子生物學實驗基礎
章 實驗室基本知識 3
節 實驗須知 3
第二節 生物化學基本操作訓練 3
第三節 學生實驗常用儀器 7
第四節 實驗室安全知識 12
第二章 常用生物化學與分子生物學技術原理 15
節 分光光度法 15
第二節 層析技術 19
第三節 電泳技術 31
第四節 離心技術 51
第五節 分子生物學基本原理 58
第二篇 生物化學與分子生物學實驗
第三章 基礎性實驗 89
實驗一 蛋白質的兩性反應及等電點測定 89
實驗二 血紅蛋白及其衍生物的吸收光譜測定 91
實驗三 蛋白質的定量測定——雙縮脲試劑法（Biuret法） 92
實驗四 蛋白質的定量測定——福林-酚試劑法（Lowry法） 95
實驗五 蛋白質的定量測定——Bradford法 96
實驗六 蛋白質的定量測定——紫外分光光度法 98
實驗七 用離子交換層析法分離混合氨基酸 99
實驗八 凝膠過濾分離高鐵血紅蛋白與高鐵氰化鉀 102
實驗九 醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白 104
實驗十 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質 106
實驗十一 核酸的定量測定 110
實驗十二 外周血白細胞DNA提取——微量法 113
實驗十三 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段——低熔點膠法 114
實驗十四 質粒DNA的提取與純化——堿裂解法 117
實驗十五 質粒DNA的提取與純化——柱層析法 119
實驗十六 聚合酶鏈反應 121
實驗十七 大腸埃希菌質粒轉化試驗 123
實驗十八 質粒DNA的限制性內切核酸酶酶切鋻定 125
實驗十九 單鏈構像多態性分析 126
實驗二十 蔗糖酶與澱粉酶的專一性 129
實驗二十一 底物濃度及抑制劑對酶促反應速率的影響 131
實驗二十二 溫度、pH對酶促反應速率的影響 133
實驗二十三 比色法血清乳酸脫氫酶活性測定 135
實驗二十四 乳酸脫氫酶同工酶活性測定 138
實驗二十五 糖原合酶活性測定 140
實驗二十六 酶法（GOD-POD法）測血糖 141
實驗二十七 肝糖原的提取與測定 143
實驗二十八 血清總膽固醇測定——三聯酶法 145
實驗二十九 脂肪皂化值和碘值的測定 146
實驗三十 肝組織的生酮作用 149
實驗三十一 血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 151
實驗三十二 轉氨基作用及其鋻定 153
實驗三十三 血氨測定 155
實驗三十四 血清尿素氮測定（二乙酰-肟法） 157
實驗三十五 血清尿酸測定 159
第四章 綜合性實驗 161
實驗三十六 微量凱氏定氮法測定血清總蛋白 161
實驗三十七 血清γ球蛋白的分離與純化 164
實驗三十八 酵母RNA的提取（濃鹽法）及成分鋻定 167
實驗三十九 凝膠過濾分離純化脲酶及其活性測定 170
實驗四十 胰島素、腎上腺素對血糖濃度的影響 174
實驗四十一 紅細胞膜的制備與膜蛋白及總膽固醇含量測定 176
實驗四十二 血清IgG的Western印跡分析 180
第五章 設計性實驗 184
實驗四十三 蛋白質的沉澱反應 184
實驗四十四 血清膽紅素測定 185
第六章 創新性實驗 187
實驗四十五 食品中常見有害添加物質的簡單檢測 187
實驗四十六 真核生物基因的克隆與表達 188
主要參考文獻 191
附錄 生物化學與分子生物學實驗常用數據 192
一、清洗液的配制 192
二素原子序數和相對原子質量表 193
三、常用計量單位換算表 194
四、常用緩衝液的配制 195
五、常見限制性內切核酸酶 201