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  • 現代細胞生物學技術
    該商品所屬分類:研究生 -> 公共課
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    【優惠價】
    380-550
    【作者】 辛華 主編 
    【所屬類別】 圖書  教材  研究生/本科/專科教材  公共課 
    【出版社】科學出版社 
    【ISBN】9787030216908
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    內容介紹



    開本:16開
    紙張:膠版紙
    包裝:平裝

    是否套裝:否
    國際標準書號ISBN:9787030216908
    叢書名:生命科學實驗指南繫列

    作者:辛華主編
    出版社:科學出版社
    出版時間:2009年01月 


        
        
    "
    編輯推薦
    本書編入實驗共119個,內容涉及研究顯微鏡與顯微圖像分析技術、電子顯微鏡技術、細胞化學技術(細胞化學、酶、免疫、熒光細胞化學)、細胞培養技術、培養細胞凋亡檢測技術、細胞融合技術、細胞與細胞器的分離技術、細胞的原位雜交技術、流式細胞術、真核細胞基因轉染與表達技術、哺乳動物基因敲除技術和干細胞與組織工程技術等。本書對每個實驗項目的原理、技術方法及注意事項都有充分的闡述,並附有大量彩色顯微照片。 
    內容簡介
    本書為高等院校研究生學習細胞生物學技術用書,全書共12章,涵蓋了細胞生物學經典實驗方法和當今細胞生物學的一些新技術、新方法,既可用於研究生細胞生物學技術教學,又可作為細胞生物學技術工具書使用。
    本書編入實驗共119個,內容涉及研究顯微鏡與顯微圖像分析技術、電子顯微鏡技術、細胞化學技術(細胞化學、酶、免疫、熒光細胞化學)、細胞培養技術、培養細胞凋亡檢測技術、細胞融合技術、細胞與細胞器的分離技術、細胞的原位雜交技術、流式細胞術、真核細胞基因轉染與表達技術、哺乳動物基因敲除技術和干細胞與組織工程技術等內容。
    本書對每個實驗項目的原理、技術方法及注意事項都有充分的闡述,並附有大量彩色顯微照片,以加深感性認識。本書注重體現理論意義和實際應用價值,適用於生物學、醫學、農學、師範院校的教師、研究生以及科研人員使用。
    目錄
    前言
    第1章 研究顯微鏡與顯微圖像分析技術
    1.1 普通光學顯微鏡的構造和使用
    1.2 倒置相差顯微鏡的原理及使用
    1.3 熒光顯微鏡的原理及使用
    1.4 激光掃描共聚焦顯微鏡技術
    1.5 顯微操作技術
    1.5.1 體細胞顯微注射技術
    1.5.2 受精卵顯微注射技術
    1.6 活細胞熒光顯微成像技術
    1.7 細胞顯微圖像分析技術
    第2章 電鏡技術
    2.1 透射電鏡
    2.2 TEM樣品制備技術前言
    第1章 研究顯微鏡與顯微圖像分析技術
    1.1 普通光學顯微鏡的構造和使用
    1.2 倒置相差顯微鏡的原理及使用
    1.3 熒光顯微鏡的原理及使用
    1.4 激光掃描共聚焦顯微鏡技術
    1.5 顯微操作技術
    1.5.1 體細胞顯微注射技術
    1.5.2 受精卵顯微注射技術
    1.6 活細胞熒光顯微成像技術
    1.7 細胞顯微圖像分析技術
    第2章 電鏡技術
    2.1 透射電鏡
    2.2 TEM樣品制備技術
    2.2.1 TEM超薄切片技術
    2.2.2 TEM負染色技術
    2.2.3 TEM細胞化學技術
    2.2.4 石蠟組織與石蠟切片的TEM樣品制備
    2.3 掃描電子顯微鏡
    2.4 SEM樣品制備
    2.4.1 常規SEM生物樣品制備
    2.4.2 SEM遊離細胞制備
    2.4.3 SEM免疫細胞化學技術
    第3章 細胞化學技術
    3.1 普通細胞化學
    3.1.1 細胞化學理論知識
    3.1.2 PAS(periodic acid Sehiff reaction)法顯示糖原
    3.1.3 蘇丹Ⅲ染色法顯示脂類
    3.1.4 酸性蛋白與堿性蛋白的顯示
    3.1.5 細胞骨架微絲蛋白的顯示
    3.1.6 Feulgen法顯示核酸
    3.1.7 甲基綠-派洛嚀法顯示核酸
    3.1.8 Giemsa染色法顯示染色質/體
    3.1.9 蘇木精-伊紅染色顯示細胞核和細胞質
    3.2 酶細胞化學
    3.2.1 酶細胞化學的基本理論
    3.2.2 堿性磷酸酶顯示
    3.2.3 金屬沉澱法顯示酸性磷酸酶
    3.2.4 聯苯胺法顯示過氧化物酶
    3.2.5 通過琥珀酸脫氫酶活性進行MTT法檢測細胞相對存活率
    3.3 免疫細胞化學
    用ABC方法來鋻定體外培養的小鼠星形膠質細胞
    3.4 熒光細胞化學與免疫熒光細胞化學
    3.4.1 吖啶橙熒光染色法
    3.4.2 間接免疫熒光細胞化學法顯示細胞中的微管蛋白
    3.4.3 用雙重免疫熒光標記法鋻定體外培養的小和神經膠質細胞
    3.4.4 用雙重免疫熒光法鋻定組織切片中的兩種細胞的方法
    第4章 細胞培養技術
    4.1 細胞培養的基本原理與技術
    4.1.1 細胞在體外生長的條件
    4.1.2 培養細胞常用設備和用品
    4.1.3 培養用品的清洗
    4.1.4 培養用品的滅菌與消毒
    4.1.5 無菌操作的基本要領和要求
    4.1.6 細胞培養用液
    4.2 細胞培養的方法
    4.2.1 原代細胞培養
    4.2.2 細胞傳代培養
    4.3 體外培養細胞的觀察方法
    4.3.1 培養細胞的生長特征與形態分型
    4.3.2 培養細胞固定、染色觀察的一般標本制備
    4.3.3 細胞計數方法
    4.3.4 細胞的顯微測量
    4.4 培養細胞的凍存、復蘇與運輸
    4.5 培養細胞增殖動力學方法
    4.5.1 生長曲線的測定
    4.5.2 分裂指數測定
    4.5.3 克隆(集落)形成試驗
    4.5.4 BrdU摻入法測定細胞增殖指數
    4.6 腫瘤細胞黏附和侵襲能力的體外檢測方法
    4.6.1 腫瘤細胞的黏附能力分析實驗
    4.6.2 細胞侵襲重建基底膜實驗
    4.6.3 腫瘤細胞遷移實驗
    4.7 哺乳動物正常組織細胞的體外培養與應用
    4.7.1 胎鼠大腦皮層神經細胞的原代培養方法
    4.7.2 含藥血清對體外培養細胞的藥理實驗
    4.7.3 四氯化碳致肝細胞損傷及SOD活性檢測
    第5章 培養細胞凋亡檢測技術
    5.1 光學顯微鏡形態學檢測
    5.1.1 臺盼藍染色法顯示凋亡細胞
    5.1.2 蘇木精-伊紅染色(HE染色)顯示凋亡細胞
    5.1.3 Giemsa染色法顯示凋亡細胞
    5.1.4 吖啶橙熒光染色顯示凋亡細胞
    5.1.5 Ho.33342與PI熒光雙染顯示凋亡與壞死細胞
    5.2 凋亡細胞的超微結構觀察
    5.2.1 透射電鏡觀察凋亡細胞
    5.2.2 掃描電鏡觀察凋亡細胞
    5.3 凋亡細胞琥珀酸脫氫酶活性檢測(MTT法)
    5.4 DNA電泳檢測凋亡梯狀帶
    5.5 細胞膜磷脂酰絲氨酸熒光顯示
    5.6 凋亡細胞原位末端標記
    第6章 細胞工程
    6.1 細胞融合
    6.1.1 聚乙二醇介導的細胞融合
    6.1.2 細胞電融合
    6.1.3 早熟染色體凝集的誘導和觀察
    6.2 細胞的分離
    6.2.1 淋巴細胞的分離純化
    6.2.2 死活細胞的分離
    6.3 細胞器的分離
    第7章 原位雜交技術
    7.1 地高辛標記的原位雜交
    7.2 放射性同位素標記的原位雜交
    7.3 胚胎整體原位雜交
    第8章 細胞化學成分的分離與測定
    8.1 蛋白質SDS-PAGE凝膠電泳
    8.2 真核細胞基因組DNA的提取
    8.3 真核細胞RNA的提取
    8.4 免疫沉澱法分離並定量分析目的蛋白質
    8.5 蛋白質免疫印跡法
    8.6 蛋白質雙向電泳分析細胞和組織中的蛋白質群
    第9章 真核細胞基因轉染與表達技術
    9.1 DNA轉染技術
    9.1.1 磷酸鈣轉染技術
    9.1.2 脂質體轉染技術
    9.2 基因在細胞中表達的檢測技術
    9.2.1 DNA印跡雜交法
    9.2.2 RNA印跡雜交法
    9.2.3 蛋白印跡雜交法
    9.2.4 綠色熒光蛋白基因轉染及檢測
    第10章 哺乳動物基因敲除技術
    10.1 常用基因打靶載體的設計原則
    10.1.1 P21(wAFl)基因打靶載體的構建
    10.1.2 C-Crk基因打靶載體的構建
    10.1.3 視黃醇脫氫酶RDH15基因打靶載體的構建
    10.2 胚胎干細胞基因敲除
    10.2.1 胚胎干細胞的增殖和維持
    10.2.2 胚胎干細胞標準電穿孔
    10.2.3 鋻定、篩選重組的胚胎干細胞
    10.3 嵌合體小鼠的制備
    10.3.1 嵌合體小鼠的產生
    10.3.2 GPI同工酶的水平澱粉凝膠電泳檢測嵌合體小鼠
    10.4 基因敲除小鼠的建立
    10.4.1 提取鼠尾DNA用PCR來檢測敲除基因
    第11章 干細胞和組織工程技術
    11.1 胚胎干細胞培養技術與方法
    11.1.1 小鼠胚胎干細胞的分離、培養及誘導分化
    11.1.2 人胚胎干細胞的分離和培養
    11.1.3 人類胚胎干細胞定向分化成神經細胞
    11.2 成體干細胞培養技術與方法
    11.2.1 成人骨髓基質干細胞培養、純化及鋻定
    11.2.2 人造血干/祖細胞的體外培養與檢測技術
    11.2.3 大鼠胚胎腦神經干細胞和祖細胞的分離培養
    11.3 神經組織工程
    第12章 流式細胞術
    12.1 流式細胞儀的結構、工作原理及應用
    12.2 流式細胞儀檢測細胞膜受體(直標法)
    12.3 流式細胞儀同時檢測細胞內和細胞外抗原
    12.4 流式細胞儀檢測細胞凋亡(PI單染色法)
    12.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡和壞死(PI和Annexin V-FITC雙染色法)
    12.6 流式細胞儀檢測凋亡細胞內遊離鈣離子濃度變化
    圖版
    在線試讀
    第3章細胞化學技術
    細胞化學(cytochemistry)或組織化學(histochemistry)是生命科學和醫學研究以及臨床診斷中不可缺少的重要的技術手段,是一門在保持組織、細胞原有生活結構狀態及化學成分的基礎上,利用物理學、化學、免疫學、分子生物學等原理與技術,對組織與細胞內的化學成分及其變化規律進行定性、定位、定量研究的科學。
    這門科學早創立於1826年,但早期的近100年進展緩慢,至20世紀30年代纔逐漸發展起來。1936年創立了酶組織化學,後來隨著電鏡和超薄切片技術的發明及細胞生物學、免疫學、生物化學和分子生物學的迅速發展,組織化學技術手段不斷豐富、創新、發展,而成為現代細胞化學。現代細胞化學包括經典的細胞化學、酶細胞化學、免疫細胞化學、熒光細胞化學、電鏡細胞化學、細胞的原位雜交等。檢測儀器除了光學顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡外,還可使用顯微分光光度計、圖像分析儀、流式細胞儀及激光共聚焦顯微鏡等對組織細胞內生物大分子進行更精確的定性、定位、定量研究分析。這門科學除了對組織進行研究外,對體外培養細胞、腹腔液細胞、血細胞等獨立存在的細胞也可以進行研究分析。細胞化學這個概念已遠遠超越了早期原有的範圍,無論從理論、內容、技術手段和研究範圍都比過去更廣泛、更深入。
    利用細胞化學技術可檢測動物、人等有機體的不同發育階段、不同組織部位及異常、生理、病理狀態下組織細胞內結構或功能成分的表達及變化特點,從而研究個體發育過程中細胞增殖與分化,遺傳與發生機制以及疾病的病因、病理診斷等,隨著生命科學後基因組計劃的執行,現代細胞化學已經體現出它的重要價值。
    ……


     
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