實驗須知  001

章  顯微鏡使用技術  003
實驗一  普通光學顯微鏡的使用  003
實驗二暗視野顯微鏡的使用  009
實驗三相差顯微鏡的使用  011
實驗四熒光顯微鏡的使用  012
實驗五電子顯微鏡的使用  017 

第二章  微生物染色技術  023
實驗一單染色法  023
實驗二復染色法  025
實驗三特殊染色法  027
實驗四負染色法  031
實驗五微生物細胞內貯藏物質的染色  032
實驗六霉菌菌絲染色  034
 
第三章  培養基制備技術  035
實驗一細菌常用培養基的配制  036
實驗二真菌常用培養基的配制  037
實驗三選擇性培養基的配制  038
實驗四鋻別性培養基的配制  040
 
第四章  消毒、滅菌與除菌技術  043
實驗一加熱及紫外線消毒與滅菌  043
實驗二過濾除菌  047
實驗三化學藥物消毒與滅菌  049
實驗四玻璃器皿的洗滌、包扎與滅菌  051
 
第五章  微生物的接種與分離培養技術  054
實驗一微生物的接種  054
實驗二微生物的分離純化方法  059
實驗三微生物的培養方法  063
實驗四微生物的培養特征觀察  067 

第六章微生物的生長與環境條件  071
實驗一微生物細胞大小的測量  071
實驗二微生物數量的測定—血細胞計數板法  073
實驗三細菌生長曲線的測定  075
實驗四酵母菌死活細胞的鋻別  076
實驗五環境因素對微生物生長的影響  077 

第七章微生物的生理生化試驗  082
實驗一細菌的生理生化試驗  082
實驗二酵母菌的生理生化試驗  088
實驗三霉菌的生理生化試驗  093
 
第八章分子微生物學實驗技術  096
實驗一細菌質粒的提取與檢測  097
實驗二細菌基因組DNA的提取  099
實驗三細菌DNA中（G C）mol%含量的測定  101
實驗四利用16S rRNA序列鋻定微生物  104
實驗五核酸分子雜交技術檢測微生物  106
實驗六利用ITS序列鋻定真菌  108
實驗七微生物群落結構多樣性的分析  110
 
第九章微生物菌種選育技術  114
實驗一誘變育種的基本程序及操作要點  114
實驗二紫外線誘變適劑量的測定  121
實驗三高產蛋白酶曲霉的選育  124
實驗四營養缺陷型突變株的篩選  126
實驗五抗噬菌體菌株的選育  128
實驗六酵母菌細胞原生質體融合  130
實驗七電誘導酵母菌與短梗霉屬間的融合  133
 
第十章菌種保藏技術  136
實驗一常用簡易保藏法  136
實驗二冷凍真空干燥保藏法  139
實驗三液氮超低溫冷凍保藏法  141
實驗四厭氧性細菌保藏法  143
實驗五噬菌體保藏法  144
實驗六食用菌菌種保藏法  145
實驗七蒸餾水或其他溶液保藏法  148
 
第十一章病毒常用實驗技術  150
實驗一病毒形態觀察與大小測定  150
實驗二病毒包涵體的觀察  151
實驗三噬菌體的分離與純化  153
實驗四噬菌體效價的測定  155
實驗五病毒的雞胚接種  157
實驗六病毒的細胞分離培養法  160
實驗七病毒的半數細胞感染量（CCID50）測定  164
實驗八病毒蝕斑分析實驗  167
 
第十二章常用免疫學實驗技術  171
實驗一抗原的制備  171
實驗二免疫血清的制備  173
實驗三凝集反應  176
實驗四沉澱反應  178
實驗五補體結合反應  180
實驗六血凝試驗與血凝抑制試驗  184
實驗七免疫酶測定法  186
實驗八中和試驗  189
實驗九細菌內毒素測定實驗（鱟試劑凝膠法）  191
實驗十外周血單個核細胞的分離與觀察  195
實驗十一巨噬細胞吞噬功能實驗  196
實驗十二人體結核菌素試驗  198
 
第十三章動物實驗技術  200
實驗一實驗動物保定法  201
實驗二實驗動物接種法  203
實驗三實驗動物采血法  207
實驗四感染動物觀察  209 

第十四章生產實踐中常用微生物分離與性能鋻定技術  212
實驗一乳酸菌的分離與性能鋻定  212
實驗二醋酸菌的分離與性能鋻定  215
實驗三谷氨酸產生菌的分離與性能鋻定  216
實驗四枯草芽孢杆菌的分離及初篩  218
實驗五酒曲中酵母菌的分離  219
實驗六啤酒酵母的分離  220
實驗七根霉的分離  221
實驗八檸檬酸產生菌的分離  222
實驗九黑曲霉糖化酶菌株的分離  223
實驗十米曲霉的分離  224
實驗十一土壤中自生固氮菌的分離  225
實驗十二豆科植物根瘤中根瘤菌的分離  226
實驗十三土壤中蘇雲金杆菌的分離  227
實驗十四土壤中放線菌的分離及其抑菌活性的測定  228
實驗十五光合細菌的分離  230
實驗十六產甲烷細菌的富集與分離  232
實驗十七香菇純種的分離  234 

第十五章食品微生物指標檢測技術  237
實驗一食品中菌落總數的測定  237
實驗二食品中大腸菌群MPN的測定  241
實驗三食品中沙門菌的檢驗  243
實驗四食品中金黃色葡萄球菌的定性檢驗  251
實驗五食品中副溶血性弧菌的檢驗  254 

附錄  260 
附錄一  常用染色液、指示劑及試劑的配制  260
附錄二溶液與緩衝液的配制  265
附錄三常用培養基配制  272
附錄四微生物學實驗中常用數據表  290
附錄五可能數檢索表  292
附錄六常見沙門氏菌抗原表  292

參考文獻  298 

微生物學實驗技術是微生物學的重要組成部分，其方法獨特、實踐性強、應用面廣、技術綜合等，已滲透到現代生命科學的相關領域並推動其發展。加強微生物學實驗教學，對培養同學們觀察能力、動手能力，提高辯證思維能力和創新能力具有重要作用，並可為日後從事微生物學相關的教學、科研和生產實踐打下扎實基礎。
本書2008年第1版名稱是《微生物學實驗技術》，2014年進行修訂並更名為《新編微生物學實驗技術》，2020年列為河南省“十四五”規劃教材。《新編微生物實驗技術》是在總結生物工程、生物制藥、食品質量與安全、食品科學與工程、乳品工程專業多年實驗教學經驗基礎上，結合往屆畢業生就業去向，參考兄弟院校的實驗教材及相關資料編寫而成。本書對微生物學的各類實驗技術和操作技能進行了較繫統的論述，一方面，著重加強同學們對微生物學基本實驗技能和動手操作能力的訓練；另一方面，著重加深同學們對微生物學實驗技術在生產實踐中應用重要性的認識。全書內容總體可概括為以下三個方面：
一、基本操作技能訓練的實驗：主要包括無菌操作技術、細菌染色與鏡檢技術、培養基制備與滅菌技術、微生物接種與分離純化技術、菌種鋻定與保藏技術等。
二、加深理論知識理解的實驗：主要包括各類微生物形態觀察、生理生化試驗、生長曲線測定、環境因素對微生物的影響、微生物菌種選育及常用免疫學技術等。
三、生產實踐中常用到的實驗：主要包括生產實踐中常用微生物分離與性能鋻定技術，以及動物實驗技術、食品微生物指標檢測技術等內容。
本次修訂在保留2014年版主要內容和特點的基礎上，新增加了18個實驗：培養基的制備2個、現代分子微生物實驗7個、病毒常用實驗技術3個、常用免疫學實驗技術6個；參照國標對食品微生物指標檢測技術一章的5個實驗進行了更新完善，力求使教材內容更加全面，更好與社會發展接軌，更好適應新時代高級專業技術人纔培養的需要。
本書的具體編寫情況為：秦翠麗編寫章、第二章、第十三章，牛明福編寫第十一章、第十四章、第十五章，尤曉顏編寫第七章、第八章、第九章、第十章，侯穎編寫第十二章、附錄，宮強編寫第三章，第四章、第五章、第六章。
本書的編寫和出版得到了河南科技大學教務處、化學工業出版社有限公司、河南科技大學食品與生物工程學院、河南科技大學動物醫學院、河南農業大學植物保護學院、洛陽師範學院生命科學院、洛陽師範學院食品與藥品學院、普萊柯生物工程有限公司、華蘭生物工程有限公司等單位的大力支持，對此表示衷心的感謝。
本書在編寫過程中還得到了河南科技大學食品與生物工程學院康懷彬、古紹彬教授，河南科技大學動物醫學院汪洋教授，河南農業大學植物保護學院郝有武博士，洛陽師範學院生命科學學院陳萬光教授、食品與藥品學院賈禮博士，普萊柯生物工程有限公司田克恭研究員，華蘭生物工程有限公司王偉潔助理研究員等的大力幫助和熱心支持，河南科技大學食品與生物工程學院龔明貴、張勇法、李市場、孫曉菲、張紅梅、趙君峰等博士為本書的資料整理和編寫工作付出了很多辛勤勞動，在此向他們一並表示衷心的感謝。
本書編寫人員均為教齡在10年以上的教學與科研一線骨干教師，他們在長期的微生物學教學與研究工作中積累了豐富的實踐經驗，本書是他們集體智慧的結晶，但由於學識水平所限，教材中的疏漏和不當之處在所難免，敬請讀者批評指正。

編者
2022年12月12日