實驗須知

生物化學實驗基本操作訓練

部分  常用生物化學與分子生物學技術及原理

第1章  分光光度法

  1.1  基本原理

  1.2  分光光度法的定性和定量分析

  1.3  分光光度計的結構

第2章  層析技術

  2.1  離子交換色譜法

  2.2  凝膠過濾色譜法

  2.3  吸附層析法

  2.4  分配色譜法

  2.5  親和層析法

第3章  電泳技術

  3.1  基本原理

  3.2  一般技術

  3.3  聚丙烯酰胺凝膠電泳法

  3.4  蛋白質的凝膠聚焦電泳法

第4章  離心技術

  4.1  基本原理

  4.2  離心機和轉子的種類

  4.3  離心分離的種類

第5章  分子生物學基本原理

  5.1  基本概念

  5.2  重組DNA技術

第6章  生化實驗常用儀器

  6.1  722型分光光度計

  6.2  精密pH計

  6.3  高速離心機

  6.4  PCR基因擴增儀

第二部分  生物化學與分子生物學實驗

第7章  蛋白質定性定量分析

  實驗一  蛋白質的沉澱反應

    1.蛋白質的鹽析

    2.用重金屬鹽沉澱蛋白質

    3.用沉澱生物堿的試劑沉澱蛋白質

    4.用無機酸沉澱蛋白質

    5.用有機酸沉澱蛋白質

    6.加熱沉澱蛋白質

  實驗二  蛋白質的兩性反應及等電點測定

    1.蛋白質的兩性反應

    2.酪蛋白的等電點的測定

  實驗三  Bradford法測定蛋白濃度

  實驗四  血紅蛋白及其衍生物的吸收光譜測定

  實驗五  微量凱氏定氮法測定血清總蛋白

  實驗六  蛋白質定量的紫外分光光度法

  實驗七  福林一酚試劑法測定血清總蛋白

  實驗八  用離子交換層析法分離混合氨基酸

  實驗九  凝膠過濾分離高鐵血紅蛋白與高鐵氰化鉀

  實驗十  凝膠過濾分離純化脲酶及其活性測定

  實驗十一  血清γ球蛋白的分離與純化

  實驗十二  醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白質

  實驗十三  聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質

  實驗十四  凝膠等電聚焦分離血清蛋白質

第8章  核酸定性定量分析

  實驗十五  酵母RNA的提取(濃鹽法)及成分鋻定

  實驗十六  核酸的定量測定——定磷法

第9章  酶學實驗

    1.酶活力

    2.初速度

  實驗十七  底物濃度及抑制劑對酶促反應速度的影響

  實驗十八  溫度、pH對酶促反應速度的影響

  實驗十九  蔗糖酶與澱粉酶的專一性實驗

  實驗二十  乳酸脫氫酶及其輔酶的作用實驗

  實驗二十一  乳酸脫氫酶同工酶活性測定

  實驗二十二  丙酮酸脫氫酶活性測定

  實驗二十三  糖原合成酶活性測定

第10章  代謝實驗

  實驗二十四  還原糖的定量測定

    1.Somogyl-shaffer-Hartmann法定糖

    2.比色法定糖

  實驗二十五  肝糖原的提取和鋻定

    1.肝糖原提取

    2.鋻定

  實驗二十六  粗脂肪的定量測定——索氏提取法

  實驗二十七  脂肪皂化值及碘值的測定

    1.脂肪皂化值的測定

    2.脂肪碘值的測定

  實驗二十八  脂肪酸的B-氧化

  實驗二十九  肝組織的生酮作用

  實驗三十  轉氨基作用及其鋻定

第11章  分子生物學實驗

  實驗三十一  外周血白細胞DNA提取(微量法)

  實驗三十二  瓊脂糖凝膠電泳

  實驗三十三  大腸埃希菌質粒轉化實驗

  實驗三十四  微量快速質粒DNA的提取與純化(堿裂解法)

  實驗三十五  限制性核酸內切酶消化DNA

  實驗三十六  從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段(低熔點膠法)

  實驗三十七  質粒的柱層析純化

  實驗三十八  聚合酶鏈反應

  實驗三十九  單鏈構像多態性分析

    1.10%聚丙烯酸胺凝膠的制備

    2.電泳

    3.銀染

    4.凝膠干燥

第12章  臨床生化實驗

  實驗四十  酶法(GOD-PAP法)測血清葡萄糖

  實驗四十一  血清尿素氮的測定

  實驗四十二  血清甘油三酯測定

  實驗四十三  紅細胞膜的制備

  實驗四十四  紅細胞膜蛋白質含量測定(改良福林-酚試劑法)

  實驗四十五  紅細胞膜總膽固醇含量的測定

  實驗四十六  維生素C含量的測定(碘滴定法)