任務一微生物細胞破碎/1

知識目標技能目標/1

知識/1

一、細胞破碎的方法/2

二、選擇破碎方法的依據/6

知識拓展微生物的細胞壁/7

實訓1利用機械和非機械細胞破碎法提取多酚氧化酶/8

一、準備工作/8

二、操作過程/9

三、結束工作/9

技能拓展細胞破碎率的測定/9

任務二發酵液的預處理/10

知識目標技能目標/10

知識/10

發酵液的預處理方法/10

知識拓展發酵液的組成/14

實訓2維生素C發酵液的預處理/15

一、準備工作/15

二、操作過程/15

三、結束工作/16

任務三發酵液的固液分離/16

知識目標技能目標/16

知識/16

一、粗濾/16

二、離心分離/19

知識拓展生化分離的一般過操作/24

實訓3蔗糖密度梯度離心法提取葉綠體/27

一、準備工作/28

二、操作過程/28

技能拓展低速大容量冷凍離心機標準操作規程/29

項目自測/30



任務四有機溶劑萃取有機小分子物質/33

知識目標技能目標/33

知識/33

一、萃取的類型及原理/33

二、有機溶劑萃取/35

知識拓展反膠團萃取及液膜萃取/38

一、反膠團萃取/38

二、液膜萃取/39

實訓4有機溶劑萃取紅霉素/40

一、準備工作/41

二、操作過程/41

三、結束工作/41

技能拓展液固萃取/42

任務五雙水相萃取生物大分子物質/42

知識目標技能目標/42

知識/42

一、雙水相萃取的基本原理/43

二、雙水相體繫的種類/43

三、雙水相萃取的影響因素/43

四、雙水相萃取操作/44

五、雙水相萃取的特點及應用/45

知識拓展超臨界萃取/45

實訓5雙水相萃取細胞色素C/47

一、準備工作/47

二、操作過程/48

三、結束工作/48

技能拓展雙水相萃取操作中多聚物及鹽的後處理/48

項目自測/49



任務六鹽析法分級分離蛋白質/51

知識目標技能目標/51

知識/51

鹽析/51

知識拓展/56

一、有機溶劑沉澱/56

二、血漿蛋白/58

實訓6硫酸銨鹽析法分級分離血漿中的IgG/59

一、準備工作/59

二、操作步驟/60

三、結束工作/60

任務七等電點沉澱法分離蛋白質/60

知識目標技能目標/60

知識/61

等電點沉澱/61

知識拓展/62

一、有機聚合物沉析/62

二、金屬離子沉析/63

三、有機酸沉析/63

四、牛奶中的蛋白質/64

實訓7等電點沉澱法分離牛乳中的酪蛋白/65

一、準備工作/65

二、操作過程/65

三、結束工作/66

任務八結晶法提純蛋白質/66

知識目標技能目標/66

知識/66

結晶/66

知識拓展/72

胃液成分/72

實訓8結晶法提純胃蛋白酶/73

一、準備工作/73

二、操作過程/74

三、結束工作/74

技能拓展結晶設備/75

項目自測/76



任務九超濾法分離生物大分子/79

知識目標技能目標/79

知識/80

一、膜的分類及性能/80

二、膜分離過程的類型/81

三、膜組件/81

四、濃差極化與消除措施/83

知識拓展膜污染的清除/83

實訓9超濾法濃縮明膠蛋白水溶液/84

一、準備工作/84

二、操作過程/85

三、結束工作/86

技能拓展中空纖維式超濾膜組件的完整性檢測/86

任務十透析法除生物大分子中的無機鹽/87

知識目標技能目標/87

知識/87

一、透析原理/87

二、透析袋/88

知識拓展膜的消毒與保存/88

實訓10透析法去除蛋白質溶液中的無機鹽/88

一、準備工作/89

二、操作過程/89

三、結束工作/90

項目自測/90



任務十一離子交換色譜純化藥物/92

知識目標技能目標/92

知識/92

離子交換色譜/92

一、色譜/92

二、離子交換色譜/95

知識拓展吸附/99

實訓11離子交換色譜分離混合氨基酸/100

一、準備工作/100

二、操作過程/101

三、結束工作/102

任務十二凝膠色譜純化藥物/102

知識目標技能目標/102

知識/102

一、色譜分離中凝膠的分類/103

二、柱色譜凝膠的選擇/104

三、凝膠柱色譜的操作/104

知識拓展疏水柱色譜/105

實訓12凝膠柱色譜純化蛋白質類

藥物/105

一、準備工作/106

二、操作過程/106

三、結束工作/107

技能拓展薄層色譜/107

任務十三親和色譜純化藥物/108

知識目標技能目標/108

知識/108

一、親和色譜的基本原理/109

二、親和吸附劑 /109

三、親和色譜的操作/112

四、親和色譜的應用/114

知識拓展/116

一、氣相色譜/116

二、高效液相色譜/117

實訓13親和色譜純化胰蛋白酶/117

一、準備工作/117

二、操作過程/118

三、結束工作/119

技能拓展紙色譜/120

任務十四電泳法純化藥物/120

知識目標技能目標/121

知識/121

一、電泳的凝膠介質/121

二、電泳分離的檢測方法/122

三、電泳繫統的構成/123

四、電泳分析常用方法/126

知識拓展雙向電泳/127

實訓14蛋白質的醋酸纖維薄膜電泳/127

一、準備工作/128

二、操作過程/128

三、結束工作/129

項目自測/129



任務十五藥物的干燥/131

知識目標技能目標/131

知識/131

一、真空干燥法/132

二、噴霧干燥法/133

三、冷凍干燥法/135

知識拓展/138

一、遠紅外線干燥/138

二、微波干燥/138

實訓15人工牛黃的真空干燥/139

一、準備工作/139

二、操作過程/139

三、結束工作/140

項目自測/140



任務十六氨基酸類藥物的提取分離/142

知識目標技能目標/142

知識/143

一、氨基酸類藥物的分類/143

二、氨基酸的理化性質/145

三、氨基酸類藥物生產方法/145

四、氨基酸類藥物的分離方法/147

知識拓展/149

一、生物藥物的類型/149

二、《中國藥典》收載的氨基酸類藥物/151

實訓16L胱氨酸的提取分離/151

一、準備工作/152

二、操作過程/152

三、結束工作/153

實訓17L亮氨酸的提取分離/153

一、準備工作/154

二、操作過程/154

項目自測/155

任務十七多肽和蛋白類藥物的提取分離/156

知識目標技能目標/156

知識/156

一、多肽類藥物/157

二、蛋白類藥物/158

三、多肽與蛋白類藥物的主要生產方法/158

實訓18胰島素的提取分離/161

一、準備工作/162

二、操作過程/163

三、結束工作/164

實訓19谷胱甘肽的提取分離/164

一、準備工作/165

二、操作過程/165

三、結束工作/165

實訓20胸腺肽的提取分離/166

一、準備工作/166

二、操作過程/166

三、結束工作/167

項目自測/167

任務十八核酸類藥物的提取分離/168

知識目標技能目標/168

知識/168

一、核酸類藥物的分類/169

二、核酸類藥物分離純化的要求/169

三、核酸類藥物的生產方法/170

四、核酸類藥物的分離方法/170

五、重要核酸類藥物的制備/172

實訓21DNA的提取分離/173

一、準備工作/173

二、操作過程/173

三、結束工作/174

實訓22ATP的提取分離/174

一、準備工作/175

二、操作過程/175

三、結束工作/176

項目自測/176

任務十九酶類藥物的提取分離/177

知識目標技能目標/177

知識/177

一、酶類藥物的性質及特性/177

二、酶類藥物的分類/178

三、藥用酶原料來源及選擇/179

四、酶類藥物的提取和純化/180

實訓23溶菌酶的提取分離/184

一、準備工作/185

二、操作過程/185

三、結束工作/187

實訓24凝血酶的提取分離/187

一、準備工作/187

二、操作過程/188

三、結束工作/188

項目自測/188

任務二十糖類藥物的提取分離/190

知識目標技能目標/190

知識/190

一、糖類藥物的分類/190

二、多糖的藥理作用/192

三、糖類藥物的性質/193

四、糖類藥物的提取方法/193

五、糖類藥物的分離純化方法/194

知識拓展多糖含量測定與純度檢驗方法/195

實訓25銀耳多糖制備及鋻定/196

一、準備工作/196

二、操作過程/197

三、結束工作/198

四、注意事項/198

技能拓展多糖常用提取方案與程序/198

實訓26硫酸軟骨素的提取分離/199

一、準備工作/200

二、操作過程/200

三、結束工作/201

項目自測/202

任務二十一脂類藥物的提取分離/203

知識目標技能目標/203

知識/203

一、脂類藥物的分類/203

二、脂類的性質/203

三、脂類藥物的臨床應用/204

四、脂類藥物生產方法/205

五、脂類藥物的分離方法/206

實訓27卵磷脂的提取分離/206

一、準備工作/207

二、操作過程/207

三、結束工作/208

實訓28豬去氧膽酸的提取分離/208

一、準備工作/208

二、操作過程/208

三、結束工作/209

項目自測/209

任務二十二抗生素與維生素類藥物的提取分離/210

知識目標技能目標/210

知識/210

一、抗生素類藥物的提取分離/210

二、維生素類藥物的提取分離/218

實訓29青霉素的提取分離/220

一、準備工作/221

二、操作過程/221

三、結束工作/222

實訓30維生素B2的提取分離/222

一、準備工作/223

二、操作過程/223

三、結束工作/224

項目自測/224

附錄1項目學習指南參考格式/226

附錄2實例訓練任務單參考格式/228

本書是以高職高專生物制藥技術專業的培養目標為基本出發點，針對高職教育培養學生的學習能力、職業能力和綜合素質的定位及培養目標，將“以就業為導向，重視教學過程的實踐性、開放性和職業性，走校企合作、工學結合道路，培養高素質技能型人纔”作為教材編寫的指導思想。依據生化產品和生化藥品生產中下遊分離純化關鍵工序的技術要求，結合高職高專基於工作過程課程體繫改革的實踐，按照“必需、夠用”為原則，以生產實際中典型藥物分離純化任務為載體，采用教學做一體化模式分項目編寫。

本書的內容選取對應於生化產品和生化藥品生產企業崗位的職業活動，重點是生化藥品生產中下遊加工技術，包括發酵液的預處理、有機物質的萃取、生物大分子的沉澱與結晶、膜分離、藥物的高度純化、藥物的干燥等生化分離基本技術和氨基酸類、多肽和蛋白類、核酸類、酶類、糖類、脂類、抗生素與維生素類等生化藥物提取分離的綜合技術。實訓內容由多所院校與多家企業共同開發，通過整合教學內容，突出職業技能的培養。為擴大學生的知識面和自我檢測，書中還設置了知識拓展、技能拓展、項目自測等內容，有利於培養學生創新思維能力，體現了“以就業為導向，以能力為核心”，實現了職業教育教學過程與工作過程的融合。

全書共分七個項目、22個任務，項目一至項目六為必修的生化分離技術；項目七是由7類生化藥物提取分離任務組成，是可以根據就業崗位要求有選擇性學習的分離純化綜合應用技術。為便於增強學生預習、自我收集工作信息、自我設計實際操作流程以及教師實施教學做一體化教學的需要，書中的附錄列出了項目學習指南及實例訓練任務單的參考格式，同時配備了所有項目學習指南和實例訓練任務單電子版的信息，供學生及教師下載使用(化學工業出版社教學資源網http：∥www.cipedu.com)。

書中項目一、項目七的任務十六由張愛華編寫；項目二、項目六和項目七的任務二十一由胡秋傑編寫；項目三和項目七的任務十九、任務二十二由趙立斐編寫；項目四由王雲慶編寫；項目五和項目七的任務二十由王春花編寫；項目七的任務十七、任務十八由劉克丹編寫。全書由張愛華統稿，孫志嘉主審。在編寫中，廣泛參考和借鋻了眾多專家與學者的研究成果，在此一並致以誠摯的謝意。

本書可作為高職高專院校制藥類和生物技術類及相關專業教材，也可作為制藥生產企業員工崗位培訓的教材。

由於編者水平有限，加上編寫時間倉促，疏漏之處在所難免，敬請廣大讀者批評指正。

編者

2012年5月