內容簡介
本教程包括顯微鏡的使用,主要細胞器的觀察,細胞培養方面的技術和方法及細胞遺傳方面的經典實驗等方面內容,力求用圖解方法將實驗過程的每一步驟詳細展示,使操作過程可視化,清晰,簡潔,便於學生按圖索驥。內容涉及30個細胞生物學的基礎實驗和綜合實驗,其中,基礎性實驗能夠滿足不同的學校教學學時的實際教學需要;提高性的綜合性實驗可以幫助同學進行創新課題的研究。
本書對實驗的設計對本科生乃至研究生的實驗操作以及技能培養都有參考意義。
目錄
顯微儀器篇1
【實驗一】光學顯微鏡的使用及生物繪圖法練習1
【實驗二】熒光顯微鏡的操作和使用9
【實驗三】體視熒光顯微鏡使用操作19
【實驗四】共聚焦激光掃描顯微鏡(CLSM)的使用25
基礎實驗篇38
【實驗五】細胞大小和數目的測量及計算38
【實驗六】細胞膜的滲透性45
【實驗七】去污劑對紅細胞膜穩定性的影響49
【實驗八】植物凝集素對紅細胞的凝集反應52
【實驗九】線粒體和液泡繫的超活染色與觀察54
【實驗十】葉綠體的分離與熒光觀察59
【實驗十一】線粒體和細胞核的制備與觀察63
【實驗十二】酸性磷酸酶的顯示方法67
【實驗十三】植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察71
【實驗十四】植物細胞胞間連絲的光學顯微鏡觀察74
【實驗十五】DNA的孚爾根(Feulgen)核反應染色法75
【實驗十六】放線菌素D誘導細胞凋亡的形態學觀察78
細胞培養篇82
【實驗十七】煙草葉片愈傷組織的誘導和培養82
【實驗十八】煙草BY2細胞的同步化培養85
【實驗十九】煙草葉肉原生質體的分離、融合與培養92
【實驗二十】雞胚細胞的原代培養96
【實驗二十一】HeLa細胞的傳代培養101
【實驗二十二】小鼠顱蓋骨成骨細胞的原代培養104
【實驗二十三】動物細胞的凍存和復蘇109
【實驗二十四】動物細胞融合實驗113
技能提高篇116
【實驗二十五】擬南芥綠色熒光蛋白標記基因的遺傳轉化116
【實驗二十六】去壁低滲火焰干燥法制備植物染色體標本123
【實驗二十七】熒光原位雜交和雜交信號檢測126
【實驗二十八】辣椒花藥發育過程中Ca2+分布對熱脅迫響應的電鏡觀察131
【實驗二十九】細胞核倍性水平的流式細胞術檢測137
【實驗三十】7500熒光PCR儀的使用方法142
附錄149
附錄1光學顯微鏡的合軸調節149
附錄2光學顯微鏡的物鏡分類149
附錄3光學顯微鏡有關術語151
附錄4熒光顯微鏡標本制作及觀察要求152
附錄5本教程涉及的主要常見試劑配制方法152
附錄6離心機的使用要點和注意事項157
附錄7722分光光度計的使用要點158
附錄8分光光度計基礎知識158
附錄9離心機轉數與離心力的列線圖159
附錄10硫酸銨溶液飽和度計算表(25℃)160
附錄11細胞化學組織技術介紹160
附錄12常見的植物激素配制方法161
附錄13原代細胞的培養方法162
附錄14農杆菌Ti質粒結構和功能介紹163
附錄15流式細胞術所用到的解離液及其配方164
附錄16細胞生物學實驗技能競賽試題及參考評分細則166
後記172