了得網醫學_預防醫學與衛生檢驗學實驗方法與技能

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內容簡介

《預防醫學與衛生檢驗學實驗方法與技能》緊緊圍繞如何激發學生的學習興趣，如何提高學生學習能力、分析和解決問題能力、實際工作能力、溝通協作能力和創新能力等培養目標，主動適應國家戰略和地方經濟社會發展的需求。《預防醫學與衛生檢驗學實驗方法與技能》共十三章，包括預防醫學與衛生檢驗學實驗基本知識與技術、毒理學實驗技術、空氣理化檢驗、水質理化檢驗、食品理化檢驗、生物材料檢驗、衛生微生物檢測、數據資料的統計分析、疾病控制與監測、案例分析、現場調查與評價、地方病及地方“特色病”檢測技術和綜合性、設計性實驗。

目錄
**章預防醫學與衛生檢驗學實驗基本知識與技術 1
**節實驗室規則及安全知識 1
第二節實驗數據的記錄、處理和實驗報告的撰寫 12
第三節常用基本操作技術 14
第四節常用分析儀器的性能檢定及分析條件的選擇 24
實驗一可見分光光度計主要性能檢定 24
實驗二鄰菲啰啉分光光度法測定微量鐵實驗條件的選擇及水中鐵含量的測定 27
實驗三熒光分光光度計主要性能指標的檢定 29
實驗四原子吸收分光光度計性能檢定 32
實驗五原子吸收分光光度法分析條件的選擇 35
實驗六 pH玻璃電極性能檢查及溶液pH的測定 37
實驗七氣相色譜儀的性能檢定 38
實驗八氣相色譜法分離條件的選擇 40
實驗九高效液相色譜儀的性能檢定 41
第二章毒理學實驗技術 47
實驗一實驗動物的準備及基本操作技術 47
實驗二敵鼠鈉對小鼠的亞慢性毒性實驗 50
實驗三小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核實驗 51
實驗四小鼠骨髓細胞染色體畸變實驗 52
實驗五小鼠精子畸形實驗 54
實驗六單細胞凝膠電泳實驗 55
第三章空氣理化檢驗 58
實驗一生產環境中氣像參數的測定及流量計的校準 58
實驗二重量法測定環境空氣中可吸入顆粒物 64
實驗三鹽酸萘乙二胺比色法測定空氣中氮氧化物 66
實驗四鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法測定空氣中二氧化硫 68
實驗五空氣中錳及其化合物的測定 71
實驗六變色酸分光光度法測定空氣中甲醛 73
實驗七生產環境空氣中粉塵濃度、分散度和遊離二氧化硅的測定 75
第四章水質理化檢驗 81
實驗一水中氨氮、亞硝酸鹽氮和硝酸鹽氮的測定 81
實驗二水中溶解氧和化學需氧量的測定 86
實驗三亞甲藍分光光度法測定水中陰離子表面活性劑 89
實驗四飲用水氯化消毒法 91
實驗五飲用水水質快速檢驗 93
實驗六二乙酰一肟-安替比林光度法測定遊泳池水中尿素 95
實驗七冷原子吸收法測定水中汞 96
實驗八離子色譜法測定生活飲用水中常見的七種陰離子 98
實驗九雙波長分光光度法測水中硝酸鹽含量 100
實驗十電導池常數及水純度的測定 102
實驗十一亞甲藍分光光度法測定水中的硫化物 103
第五章食品理化檢驗 105
實驗一可見分光光度法測定食品中亞硝酸鹽含量 105
實驗二酒石酸亞鐵分光光度法測定茶葉中茶多酚含量 107
實驗三氫化物發生-原子熒光光度法測定食品中總砷和總汞的含量 108
實驗四紙色譜法測定飲料中人工合成色素 110
實驗五氣相色譜法測定食品中有機氯農藥殘留量 112
實驗六氣相色譜外標法測定蒸餾酒和配制酒中甲醇和乙酸乙酯的含量 114
實驗七高效液相色譜法測定飲料中山梨酸、苯甲酸和糖精鈉的含量 116
實驗八化學性食物中毒的快速檢驗 117
實驗九食品中營養成分分析 123
第六章生物材料檢驗 141
實驗一苦味酸分光光度法測定尿中肌酐的含量 141
實驗二火焰原子吸收光譜法測定發中銅鐵鋅的含量 142
實驗三火焰原子吸收光譜法測定血清中鈣鎂的含量 144
實驗四流動注射氫化物發生原子吸收光譜法測定血清中硒的含量 145
實驗五石墨爐原子吸收光譜法測定全血中鉛的含量 147
實驗六火焰原子吸收分光光度法測定尿中錳的含量 148
實驗七尿中鉛的測定 149
實驗八氟離子選擇性電極法測定尿中氟化物的含量 154
實驗九尿中維生素B 2的測定 156
實驗十高效液相色譜法測定尿中馬尿酸和甲基馬尿酸的含量 159
實驗十一三氯化鐵分光光度法測定全血膽堿酯酶的活性 160
實驗十二頂空氣相色譜法測定血中乙醇的含量 162
實驗十三放射免疫分析法測定血清中睪酮的含量 164
實驗十四黃嘌呤氧化酶法測定小牛血清中T-SOD的活力 165
第七章衛生微生物檢測 167
實驗一細菌塗片的制備和革蘭染色 167
實驗二培養基制備技術 168
實驗三空氣中細菌的檢測與消毒劑消毒效果評價 171
實驗四水中大腸菌群的測定 173
實驗五肉中沙門菌的檢測 180
實驗六奶粉中金黃色葡萄球菌的檢測 182
實驗七變質食品中蠟樣芽胞杆菌的檢測 184
實驗八化妝品中銅綠假單胞菌的檢測 187
實驗九物體表面乙型肝炎表面抗原的檢測 189
實驗十糧食中真菌的檢測 191
第八章數據資料的統計分析（SPSS統計軟件在醫學中的應用） 194
實驗一數據庫的建立、導入與導出和數據文件的整理 194
實驗二統計描述 204
實驗三均數比較過程 214
實驗四方差分析 220
實驗五卡方檢驗 227
實驗六基於秩次的非參數檢驗 239
實驗七相關與回歸 248
實驗八多重線性回歸 254
實驗九二分類Logistic回歸分析 260
第九章疾病控制與監測 265
實驗一疾病的分布 265
實驗二現況研究 272
實驗三篩查及診斷試驗的評價 274
實驗四病例對照研究 276
實驗五隊列研究 281
實驗六實驗流行病學 283
實驗七病因不明疾病的調查 287
實驗八流行病學資料分析評價 291
第十章案例分析 294
實驗一塵肺X線胸片閱讀 294
實驗二職業衛生調查及案例分析 297
實驗三環境流行病學調查資料分析——環境砷污染對居民健康影響的調查研究 301
實驗四食物中毒調查處理與案例分析 305
實驗五食品安全監督管理案例討論 308
實驗六蛋白質功效比值實驗設計 309
實驗七營養性疾病案例討論 311
第十一章現場調查與評價 314
實驗一現場調查設計方法 314
實驗二傳染病爆發調查 318
實驗三兒童生長發育測量 320
實驗四骨齡評價 326
實驗五心理行為測量與評價 329
實驗六學習疲勞測定方法 335
實驗七膳食調查與評價 338
實驗八慢性病（高血壓）飲食治療食譜設計 341
實驗九高校學生食堂HACCP設計 345
實驗十突發公共衛生事件的現場處置 347
第十二章地方病及地方“特色病”檢測技術 353
**節砷及砷化物的檢測分析技術 353
第二節布氏菌病的調查與防治技術 357
第十三章綜合性、設計性實驗 366
實驗一健康教育與健康促進項目計劃設計 366
實驗二教室環境的衛生調查與評價 368
實驗三社區健康教育項目材料制作及干預和評價的案例分析 371
實驗四糖尿病患者營養與膳食指導 374
實驗五小鼠經口急性毒性試驗 376
實驗六化學物毒理學安全性評價 379
實驗七鼠疫疫情監測 380
實驗八腸球菌慶大霉素高水平耐藥基因檢測 383
實驗九職業性噪聲聾的聽力測定 385
實驗十預防肥胖營養教育 386
實驗十一兒童少年生長發育資料的綜合分析 387
實驗十二空氣衛生監測與評價（點污染源對城市大氣質量影響調查） 392
實驗十三地表水污染的調查與評價 395
參考文獻 398

前言

序言

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**章預防醫學與衛生檢驗學實驗基本知識與技術
【能力培養目標】本章知識性豐富、實踐性和應用性很強。通過本章學習，不僅使預防醫學與衛生檢驗檢疫學專業學生鞏固、復習並深入學習的基本實踐技能，而且為後期的專業實驗訓練奠定堅實的基礎。本章“常用分析儀器的性能鋻定和分析條件的選擇”相關實驗內容豐富、實踐技能要求較高，大部分實驗內容依據國家標準撰寫完成，這部分的滲透不僅使學生能了解預防醫學和衛生檢驗檢疫專業用到的主要精密儀器設備，而且儀器本身的發展、性能的提高，以及國標方法的完善都會對學生創新能力培養提供極大的舞臺。
**節實驗室規則及安全知識
一、實驗室一般安全規則
實驗室是實驗教學、檢測檢驗和科學研究的主要場所，實驗室安全是一切實驗室工作正常進行的基本保障。實驗室事故的發生起因於實驗室管理不善、措施不力、操作不當或安全意識不夠等。因此，全面繫統地掌握實驗室安全基本知識，提高安全意識、防患於未然，不僅能確保實驗室工作正常進行、避免實驗室事故發生、防止人員傷亡和財產損失，而且也是實驗室工作者遵守實驗操作技術規範、確保分析結果準確可靠的基本前提。
（一）實驗室用水安全
實驗室用水安全是實驗室*基本的安全保障，嚴防“跑、冒、滴、漏”等現像發生，具體需注意以下幾點。
（1）經常關注水龍頭、上下水管開關處或各種連接處是否有失靈、松脫或漏水等現像發生，如有應及時修理。
（2）下水道排水不暢時，應及時疏通。
（3）冷卻循環水使用的輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處須用管箍夾緊；下水管必須插入水池的下水管中。
（4）純淨水制備應嚴格按照儀器“操作規程”進行操作，取水完畢後應注意及時關閉取水開關，防止溢流。
（5）我國北方地區實驗室鼕季多采用水暖取暖，因此應每年檢修並經常檢查暖氣片或暖氣管道，以防漏水造成不必要的損失。
（二）實驗室用電安全
實驗室用電安全主要指在用電過程中應切實保障實驗人員的人身安全和實驗室儀器設備安全。實驗室中經常使用各種儀器儀表，若用電不當，容易引發觸電或產生大量靜電，從而造成儀器設備損壞，甚至引發火災。
1.觸電的預防觸電（getanelectricshock）是指人體接觸帶電體時，電流以很快的速度通過人體的過程。實驗室應加強安全用電教育，掌握用電基本常識，可有效預防觸電。常用預防觸電的方法有：①不用潮濕的手接觸電器、燈頭或插頭等；②所有電源的裸露部分都應有絕緣裝置，電器外殼應接地、接零；③已損壞的接頭、插頭、插座或絕緣不良的電線應及時更換；④大型儀器設備應安裝接地或漏電保護裝置，小型電器設備采用安全電壓；⑤維修或安裝電器設備時，首先應切斷電源；⑥如遇人觸電，應首先切斷電源，然後進行處理。
2.靜電的消除靜電（staticelectricity）是一種處於靜止狀態的電荷，是由不同物體間接觸後分離、相互摩擦或感應而產生的。如果靜電得不到有效控制，就可能危及大型精密儀器的安全，造成器件損壞或故障；靜電放電的火花還可能引起易燃混合氣體的燃燒爆炸，從而導致人員傷亡和財產損失，釀成事故。因此，實驗室應制定有效的靜電防護措施，在有汽油、苯、氫氣等易燃物質的場所，要特別注意防止靜電危害。減少靜電的產生、設法導走或防止靜電放電是實驗室防止靜電危害的主要途徑。具體可采取以下幾方面措施：①防靜電區內應采用導電性地面，不要使用塑料地板、地毯或其他絕緣性好的地面材料，可以鋪設防靜電地板；②在易燃易爆場所，應穿戴導電纖維或防靜電合成纖維制成的防靜電工作服、防靜電鞋和防靜電手套，不要穿化纖類織物、膠鞋及絕緣鞋底的鞋；③高壓帶電體應有屏蔽措施，以防人體感應產生靜電；④進入實驗室前，應徒手接觸金屬接地棒，以消除人體從外界帶來的靜電；坐著工作的場合，必要時可戴接地腕帶；⑤適度增加室內環境濕度，保持環境空氣中的相對濕度在65%以上，便於靜電逸散；⑥必要時，可使用抗靜電添加劑、靜電中和器（也稱靜電消除器）來消除靜電危險。
另外，實驗室應了解電起火和用電不當造成儀器設備損壞的原因，積極采取相應的預防措施，確保用電安全。
（三）實驗室用氣安全
實驗室用氣主要涉及壓縮氣體和高壓蒸汽。
1.壓縮氣體實驗室常用的壓縮氣體有氧氣、氫氣、氮氣等，一般通過高壓氣體鋼瓶獲得，氣體鋼瓶具有種類齊全、壓力穩定、純度較高、使用方便等優點。由於鋼瓶屬於高壓容器，在移動、搬動過程中受到震動、撞擊及受熱時，會增加其爆炸的風險；此外容器內往往充裝有易燃、易爆、有毒氣體等。因此，使用者在使用過程中必須嚴格遵守安全操作規程，並注意與之隔離或采取相應的報警和防護裝置，避免事故發生。
（1）高壓鋼瓶內裝氣體分類：按鋼瓶內充裝氣體臨界溫度及物理性質的不同，可將鋼瓶內裝氣體分為3種。①壓縮氣體：臨界溫度＜10℃，且經高壓壓縮仍處於氣態的氣體稱為壓縮氣體，如氧、氮、氫等。②液化氣體：臨界溫度≥10℃，經高壓壓縮轉為液態並與其蒸汽處於平衡狀態者稱為液化氣體。臨界溫度在10～70℃者稱為高壓液化氣體，如二氧化碳、氧化亞氮；臨界溫度高於70℃，且在60℃時飽和蒸氣壓大於0.1MPa的氣體稱為低壓液化氣體，如氨、氯、硫化氫等。③溶解氣體：有些氣體單純加高壓壓縮可發生分解，且有爆炸等危險，必須在加高壓的同時，將其溶解於適當的溶劑中，並由多孔性固體物吸附，在15℃以下壓力達0.2MPa以上，該類氣體稱為溶解氣體（或稱氣體溶液），如乙炔等。
此外按鋼瓶內充裝氣體的化學性質不同分為：①可燃氣體，如氫、乙炔、丙烷、石油氣等；②助燃氣體，如氧、氧化亞氮等；③不燃氣體，如氮、二氧化碳等；④惰性氣體，如氮、氖、氬等；⑤劇毒氣體，如氟、氯等。
（2）高壓鋼瓶的標記：各種氣體鋼瓶的瓶身按規定均應有明確和規範的標記，標記的內容如下。①顏色標記：瓶身必須按規定漆上相應的標志色漆，並用規定顏色的色漆寫上氣瓶內容物的中文名稱，畫出橫條標志（表1-1）。顏色標記有助於識別氣瓶的種類，避免使用時發生混淆而導致安全事故。②鋼印標記：每個氣瓶肩部都有鋼印標記，包括制造鋼印標志和檢驗鋼印標志。標明制造廠商、氣瓶編號、設計壓力及其他技術參數、制造年月、檢驗單位及檢驗日期等信息。氣瓶必須定期做抗壓試驗，並由檢驗單位打上鋼印。
表1-1 常見高壓氣體鋼瓶的標記
（3）高壓鋼瓶的安全使用：使用高壓鋼瓶時應注意以下幾方面。①實驗室室內存放的氣體鋼瓶不宜過多，氣瓶應可靠地固定在支架上或用鐵鏈鎖緊以避免傾倒，鋼瓶須做好標識分類分處存放，嚴禁可燃性氣體瓶和助燃性氣體瓶混放。②儲氣的鋼瓶不得放在烈日下曝曬或靠近熱源，以免引起鋼瓶爆炸。氧氣瓶、可燃氣體鋼瓶嚴禁靠近明火，與明火距離應不小於10m，不能達到時，應采取可靠的隔熱防護措施，距離不得小於5m；采暖期間，氣瓶與暖氣片距離不小於1m。③搬運及存放壓縮氣體鋼瓶時，一定要將鋼瓶上的安全帽旋緊，運輸時不得將手扶在氣門上，以防氣門被打開；不得摔擲、敲擊、滾滑或劇烈震動瓶身。④使用時為了降低壓力並保持壓力平穩，必須裝置減壓閥，各種氣體鋼瓶的減壓閥不能混用。⑤開啟高壓氣瓶時，操作者應站在氣瓶出口的側面，緩慢操作，以免氣流過急衝出，發生危險；使用完畢後，應首先關閉氣瓶開關閥，放盡減壓閥進出口的氣體後，再將減壓閥調節螺杆松開。⑥氧氣瓶及其專用工具嚴禁與油類接觸，操作人員也**不能穿戴沾有各種油脂或油污的工作服和手套，以免引起燃燒或爆炸。⑦瓶內氣體不得全部用盡，剩餘殘壓一般要在0.05MPa以上，可燃氣體剩餘殘壓應在0.2～0.3MPa或更高的氣壓（如氫氣剩餘不應低於2.0MPa），否則將導致空氣或其他氣體進入鋼瓶，再次充氣時將影響氣體的純度，甚至發生危險。⑧各種鋼瓶必須定期進行技術檢驗，充裝一般氣體的鋼瓶，每3年檢驗1次，對於充裝腐蝕性氣體的鋼瓶每2年檢驗1次。在使用過程中，如發現有嚴重腐蝕或損傷，應提前進行檢驗。
2.高壓蒸汽即高溫高壓下產生的飽和壓力蒸汽，常用來對物品進行消毒滅菌，一般由高壓蒸汽滅菌器產生。在使用滅菌器時，必須嚴格遵守操作規程，否則容易發生燙傷、爆炸等意外事故。實驗室中常用的高壓蒸汽滅菌器有重力置換式高壓蒸汽滅菌器、燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器和預真空高壓蒸汽滅菌器。
無論哪種類型的高壓蒸汽滅菌器，使用時都應注意以下幾個方面：①每次滅菌前，應檢查滅菌器是否處於良好的工作狀態、安全閥性能是否良好、水位是否符合要求等。②在滅菌器內擺放滅菌物品時，不宜過多過擠，應保證安全閥出氣孔暢通放氣，嚴禁堵塞。③不能使用高壓蒸汽滅菌器消毒可燃物質、易燃易爆物質、氧化性物質和含堿金屬成分的物質，否則會導致爆炸、腐蝕內膽和內部管道、破壞墊圈等。④含有鹽分的液體漏出或溢出時，一定要及時擦干，密封圈一定要徹底擦干淨，否則會腐蝕容器和管道。⑤滅菌完畢後，減壓不要過快過猛，以免引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。在打開蓋子前，應確認壓力已歸於“零”位。⑥**不允許擅自改造高壓蒸汽滅菌器。⑦不要在爆炸性氣體或易燃液體附近使用此類設備。⑧除蒸餾水外，不要向容器內加入任何液體。⑨移動此類設備時，應將蓋子鎖上；移動蓋子時，不要拉蓋子的手柄，否則蓋子會變形，難以蓋嚴，影響使用。
（四）實驗室生物安全
常規實驗室生物安全一般指實驗工作中不可避免地要接觸或使用到病原微生物，由於防護不當而引起病原體對實驗室工作人員、環境造成一定的潛在危害，甚至引起疾病的流行，從而危及公眾健康和生命安全。因此，加強實驗室生物安全防護和管理是實驗室工作的重要內容之一。
1.生物因子指微生物和生物活性物質。生物因子危害程度決定著實驗室應采取何種安全防護措施。WHO將生物因子危害等級由低至高分為Ⅰ～Ⅳ級，分級主要依據生物因子對個體和群體的危害程度，包括生物因子的傳染性、致病性、預防與治療的有效性等。我國《病原微生物實驗室生物安全管理條例》將病原微生物分為四類，與WHO分級排序相反，即危害程度由高至低分為一至四類。危害性Ⅲ級和Ⅳ級的病原微生物統稱為高致病性病原微生物。
WHO生物因子危害程度分級如下。
（1）生物因子危害性Ⅰ級：不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子，即對個體危害和群體危害處於較低水平。
（2）生物因子危害性Ⅱ級：病原體能引起人或動物發病，但一般情況下對實驗室工作人員、社區人群、家畜或環境不會引起嚴重危害。具備有效治療和預防措施，並且傳播風險有限。對個體具有中等危害性，對群體危害有限。此類細菌有：龜分枝杆菌、傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門菌等；此類病毒有：腺病毒伴隨病毒、冠狀病毒、EB病毒、各種肝炎病毒、流行性感冒病毒、麻疹病毒、輪狀病毒等。
（3）生物因子危害性Ⅲ級：能引起人或動物嚴重疾病，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，對病原體具有有效的預防和治療方法。對個體危害性高，但對群體危害低。此類細菌有：炭疽芽孢杆菌、布氏菌、結核分枝杆菌等；此類病毒有：瘋牛病毒、人克-雅病毒、SARS冠狀病毒、脊髓灰質炎病毒等。
（4）生物因子危害性Ⅳ級：很容易引起人或動物的嚴重疾病，病原體在人與人、人與動物，或動物與動物之間很容易發生直接、間接或因偶然接觸的傳播。無有效的疫苗預防和治療方法，對個體和群體均具有很高的危害性。此類細菌有：粗球孢子菌、夾膜組織胞質菌、杜波組織胞質菌等；此類病毒有：天花病毒、黃熱病毒、克裡米亞剛果出血熱病毒、埃博拉病毒、馬爾堡病毒等。
2.實驗室生物安全防護實驗室生物安全防護措施對應於病原微生物危害程度分級。對於操作危險程度Ⅰ～Ⅳ級微生物的實驗室，都要求具有相應的生物安全防護等級（biosafetylevel，BSL），即BSL-1、BSL-2、BSL-3和BSL-4實驗室生物安全防護，動物實驗室

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