●前言
上篇超微細胞化學的常用儀器和樣品制備技術
第一章緒論
第一節細胞化學的定義和發展
一、細胞化學的定義
二、細胞化學的發展
第二節超微細胞化學的研究內容
一、生物超微結構的定義
二、超微細胞化學的定義
三、超微細胞化學的研究內容
第三節超微細胞化學在生命科學研究中的應用
一、生物科學
二、農林科學
三、醫學科學
第二章透射電子顯微鏡的結構原理和樣品制備技術
第一節透射電子顯微鏡的發展過程
一、從光學顯微術到電子顯微術
二、電子顯微鏡發展簡史
三、電子顯微鏡的分類
四、電鏡技術發展概況
第二節透射電子顯微鏡的結構原理
一、透射電子顯微鏡的成像原理
二、提高生物樣品反差的方法
三、透射電子顯微鏡的結構
第三節透射電子顯微鏡樣品制備與觀察
一、取樣
二、固定
三、脫水
四、滲透
五、包埋
六、切片
七、電子染色
八、透射電鏡觀察
第三章掃描電子顯微鏡的結構原理和樣品制備技術
第一節掃描電子顯微鏡的結構原理
一、掃描電子顯微鏡的原理
二、掃描電子顯微鏡的結構
第二節掃捕電子顯微鏡樣品的制備
一、常規制樣方法
二、直接觀察樣品的制備方法
第三節環境掃描電鏡技術簡介
一、環境掃捕電鏡概述
二、環境掃描電鏡結構特點
三、環境掃描電鏡在生命科學中的應川
第四章新型的電子顯微技術
第一節分析電子顯微鏡技術
一、分析電子顯微鏡概述
二、分析電子顯微鏡X射線顯微化學原理
三、分析電子顯微鏡樣品制備步驟
四、分析電子顯微鏡的應用
第二節冷凍電子顯微鏡技術
一、生物樣品的快速冷凍
二、冷凍同定方法簡介
三、冷凍置換
四、冷凍超薄切片技術
五、冷凍斷裂和蝕刻技術
第三節冷凍電子顯微鏡三維重構技術
一、冷凍電子顯微鏡三維重構技術發展過程
二、冷凍電子顯微鏡三維重構原理
三、幾種常用的電子顯微鏡三維重構技術及其應用
第五章其他相關儀器的結構原理和應用
第一節掃描隧道顯微鏡
一、掃描隧道顯微鏡結構原理
二、掃捕隧道顯微鏡的生物樣品制備
三、掃捕隧道顯微鏡在生命科學巾的應用
第二節原子力顯微鏡
一、原子力顯微鏡工作原理
二、原子力顯微鏡樣品的制備
三、原子力顯微鏡在生命科學中的應用
第三節激光共聚焦顯微鏡
一、激光共聚焦顯微鏡成像原理
二、激光共聚焦顯微鏡基本特征
三、激光掃捕共聚焦顯微鏡圖像模式
四、標本制備和圖像采集
五、激光共聚焦顯微鏡存生命科學中的應用
下篇超微細胞化學的原理和技術
第六章生物大分子及離子的常規超微細胞化學技術
第一節蛋白質超微細胞化學定位
一、結構蛋白的定位技術
二、功能蛋——生物酶的定位原理和方法
第二節主要生物酶的超微細胞化學定位
一、水解酶
二、氧化還原酶
三、其他酶類
四、細胞中一些重要細胞器的標志酶定位
第三節核酸的超微細胞化學技術
一、乙酸雙氧鈾染色法
二、孚爾根一六亞甲四胺銀染色法
三、孚爾根-席夫-乙醇鉈染色法
四、乙酸雙氧鈾-EDTA染色法
五、核酸酶抽提定位法
第四節糖類的超微細胞化學技術
一、過碘酸氧化法
二、靜電結合法
三、凝集素顯示細胞中糖類
四、澱粉酶消化法檢測糖原
第五節脂類的電鏡細胞化學技術
一、保存脂類的包埋劑
二、保存膽同醇的毛地黃皂苷法
三、保存磷脂的鐵法
第六節細胞巾相關離子定位技術
一、陽離子的超微細胞化學定位
二、陰離子的超微細胞化學定位
三、自由基的超微細胞化學定位
第七章免疫電鏡細胞化學技術
第一節免疫電鏡細胞化學原理
一、免疫電鏡細胞化學發展過程
二、免疫電鏡細胞化學相關概念
三、免疫電鏡細胞化學原理
第二節免疫電鏡細胞化學制樣方法
一、樣品的前期處理
二、樣品包埋
第三節膠體金標記免疫電鏡技術
一、膠休金的性質
二、膠體金的制帑
三、蛋白質-膠體金的制備
四、膠體金標記免疫電鏡制樣
第四節酶標記免疫電鏡技術
一、酶標記抗體方法
二、酶標記免疫電鏡技術制樣舉例
第五節鐵蛋白標記免疫電鏡技術
一、鐵蛋白制備
二、鐵蛋白和抗體的結合
三、鐵蛋白標記抗體的純化
四、鐵蛋白標記抗體的應用
第六節其他免疫電鏡技術和發展
一、冷凍超薄切片免疫電鏡技術
二、冷凍蝕刻免疫電鏡技術
三、掃描免疫電鏡技術
四、免疫細胞化學與圖像分析簡介
第八章電鏡放射自顯影技術
第一節電鏡放射自顯影技術的原理
一、放射性同位素
二、核射線
三、核乳膠
四、有關參數
五、電鏡放射自顯影基本原理
第二節電鏡放射自顯影的樣品制備
一、放射自顯影樣品制備過程和電鏡觀察
二、圖像的分析
三、放射性防護
第三節電鏡放射自顯影技術在生命科學巾的應用
第九章顯微細胞化學概述
第一節常規細胞化學技術
一、核酸的細胞定位
二、蛋白質的細胞定位
三、碳水化合物的細胞定位
四、脂類的細胞定位
五、無機物質的細胞定位
第二節酶細胞化學
一、過氧化物酶
二、細胞色素氧化酶
三、琥珀酸脫氫酶
四、堿性磷酸酶
五、酸性磷酸酶
六、三磷酸腺苷酶
第三節免疫細胞化學技術
一、免疫膠體金細胞化學
二、免疫膠休鐵細胞化學
三、免疫酶細胞化學
四、免疫熒光細胞化學
第十章超微和顯微細胞化學在分子生物學中的應用
第一節生物大分子展層技術
一、蛋白質大分子展層和電鏡觀察
二、核酸大分子展層和電鏡觀察
第二節DNA及DNA結合蛋白的電子顯微術
一、掃描電鏡和掃捕透射電鏡下的DNA及DNA結合蛋白成像
二、透射電鏡下的DNA及DNA結合蛋白成像
第三節核酸和核蛋白復合物的快速印跡法
一、電鏡載網的制備
二、樣品制備及電泳
三、核蛋白復合物轉移同定到載網上
四、載網旋轉金屬投影及電鏡成像
第四節電鏡原位核酸分子雜交的原理與技術
一、電鏡原位雜交的種類
二、電鏡原位核酸分子雜交制樣步驟概述
第五節電鏡原位核酸分子雜交技術的應用
一、應用生物素標記DNA探針電鏡原位雜交技術
二、應用地高辛標記rRNA探針的電鏡原位雜交技術
第六節顯微細胞化學在分子生物學中的應用
一、光鏡水平的核酸分子原位雜交
二、原位PCR方法
參考文獻
附錄Ⅰ常用試劑的配制
附錄Ⅱ縮略語對應表
圖版

《超微細胞化學的原理與技術》是在華中農業大學研究生課程“生物電鏡技術與超微細胞化學”和生物學同家理科基地班課程“細胞化學”講義的基礎上編寫而成的。分為上、下兩篇，共10章。上篇繫統介紹了超微細胞化學的常用儀器和樣品制備技術，包括透射電子顯微鏡、掃捕電子顯微鏡、掃捕隧道顯微鏡、原子力顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡等的工作原理和樣品制備技術；另外，還對分析電鏡技術、冷凍電鏡技術、冷凍電鏡三維重構技術等作了簡單說明。下篇詳細介紹了超微細胞化學的原理和技術，同時舉例說明了相應技術在農業和生命科學研究中的應用，主要包括生物大分子及離子的常規定位技術、免疫電鏡細胞化學技術、電鏡放射自顯影技術、顯微細胞化學概述、超微和顯微細胞化學在分子生物學中的應用等內容。