| | | | 分子生物學與細胞生物學基礎實驗教程 科學與自然 孫群 中國林業 | | 該商品所屬分類：圖書 -> ε | | 【市場價】 | 99-144元 | | 【優惠價】 | 62-90元 | | 【出版社】 | 中國林業出版社 | | 【ISBN】 | 9787503857744 | | 【折扣說明】 | 一次購物滿999元台幣免運費+贈品
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| | 內容介紹 | |
出版社：中國林業出版社 ISBN：9787503857744 商品編碼：65821102021 開本：大16開 出版時間：2010-01-01 頁數：76 代碼：20
"| 商品基本信息，請以下列介紹為準 | | 商品名稱： | 分子生物學與細胞生物學基礎實驗教程 科學與自然 書籍 | | 作者： | 孫群 | | 代碼： | 20.0 | | 出版社： | 中國林業出版社 | | 出版日期： | 2010-01-01 | | ISBN： | 9787503857744 | | 印次： | 1 | | 版次： | 1 | | 裝幀： | 平裝 | | 開本： | 大16開 |
| 內容簡介 | 本教程為一本實驗作指導，分為分子生物學實驗與細胞生物學實驗兩個部分。分子生物學實驗包括：大腸杆菌感受態細胞的制備及轉化、質粒DNA的提取及瓊脂糖凝膠電泳、DNA重組、重組DNA的酶切鋻定、大腸杆菌中表達蛋白的超聲破碎抽提、蛋白質的制備電泳、血清抗體的快速親和純化、免疫印跡、GST的親和純化及純化過程的SDS—PAGE分析等；細胞生物學實驗以四膜蟲為主要實驗材料，包括細胞計數、酸性磷酸酶染色、福爾根染色、姬姆薩染色、細胞核與纖毛的分離以及間接免疫酶標染色顯示纖毛等實驗，還補充了牛蛙骨髓細胞染色體的制備和CHO細胞中間纖維的免疫酶標染色兩個實驗。
本書可作為一般綜合性院校、師範院校和農業院校有關專業的分子生物學實驗和細胞生物學實驗的教材或實驗教學參考書，對有關的初、中級研究人員也有一定的參考價值。 |
| 目錄 | 部分 分子生物學實驗
實驗的總體設計和實驗l3程安排
實驗一 大腸杆菌感受態細胞的制備及轉化
實驗二 質粒DNA的提取
實驗三 質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗四 DNA重組
實驗五 轉化後細菌菌落的快速裂解及質粒大小的檢查
實驗六 重組DNA的酶切鋻定
實驗七 大腸杆菌中表達的GFP的超聲破碎抽提
實驗八 GFP血清抗體的瓊脂免疫雙擴散檢測
實驗九 非變性條件下GFP的制備電泳
實驗十 GFP血清抗體的快速親和純化
實驗十一 免疫印跡
實驗十二 GST的親和純化與純化過程的SDS．PAGE分析
實驗考勤及完成情況登記表
第二部分 細胞生物學實驗
四膜蟲簡介
實驗一 四膜蟲的計數
實驗二 一些化學試劑對四膜蟲影響的觀察
實驗三 四膜蟲吞噬的觀察及酸性磷酸酶染色
實驗四 福爾根染色顯示四膜蟲細胞核DNA
實驗五 四膜蟲饑餓誘導後接合行為與細胞核變化的姬姆薩染色觀察
實驗六 四膜蟲細胞核與纖毛的分離
實驗七 間接免疫酶標染色顯示四膜蟲纖毛
實驗八 牛蛙骨髓細胞染色體的制備
實驗九 CH0細胞合並離心處理後中間纖維的免疫酶標染色
主要參考文獻
附錄一：GFP和GST血清抗體的制備
附錄二：實驗所需設備器材清單 |
| 摘要 | 本實驗的設計圍繞著綜合兩字展開。它不是由彼此孤立的、相互間缺乏內在聯繫的一個個實驗組成的，而是把生物學研究中常用的那些分子生物學技術，以融合蛋白的表達和免疫印跡檢測為主線，按照邏輯順序有機地揉合在一起，構成了一個前後連貫、相互呼應的整體，從而體現了實驗的綜合性。
實驗包括了從質粒的提取、DNA凝膠電泳、融合蛋白的表達質粒的構建、大腸杆菌中外源蛋白的表達、分離和制備電泳、血清抗體的快速親和純化，直到後用純化的抗體去進行免疫印跡檢測等內容。整個實驗組成了一個繫列，或者說一條完整的鏈條，一環接一環，環環相扣，不可割裂。在修完本實驗課程後，同學們對分子生物學基本、常用的技術應該能夠比較熟悉，有些甚至基本掌握了。這將為同學們今後的學習和工作打下一個比較堅實的分子作的基礎。
實驗的基本思路，是將目前生物學研究中常使用的一種標記蛋白——綠色熒光蛋白（GFP）的基因，與另一種經常使用的工具性分子——蛋白谷胱苷肽轉移酶（GST）的基因連在一起，構建成GSI-GFP融合蛋白的表達質粒，令其在大腸杆菌中表達。之後，用經親和純化的GFP血清抗體做免疫印跡，檢測是否有融合蛋白的表達。
實驗分為兩個部分：前一部分是核酸的作，構建GST-GFP融合蛋白的表達質粒；後一部分是蛋白的作，包括GFP的分離和制備性電泳純化、血清抗體的快速親和純化和免疫印跡檢測。
核酸部分的實驗流程如圖0-1所示。 |
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