●章緒論/001
1.1降解石油烴產甲烷的研究背景002
1.2降解石油烴產甲烷的目的和意義003
1.3降解石油烴產甲烷的國內外研究進展005
1.3.1降解石油烴產甲烷的功能菌群008
1.3.2影響微生物厭氧降解產甲烷的條件018
1.3.3石油降解的副產物019
1.3.4石油烴厭氧代謝機理019
1.3.5降解石油烴產甲烷的微生物分析方法021
1.4主要研究內容及技術路線022
1.4.1主要研究內容022
1.4.2主要技術路線023
參考文獻024
第2章降解石油烴產甲烷菌群的初篩/038
2.1主要儀器和試劑043
2.1.1主要儀器043
2.1.2主要試劑043
2.2實驗設計和方法045
2.2.1實驗設計045
2.2.2實驗方法048
2.3實驗結果與討論054
2.3.1采出液理化性質分析054
2.3.2YH5和TH2菌群的初篩055
2.3.3產甲烷前後石油烴的變化060
2.3.4YH5和TH2菌群結構的分析064
2.4本章小結070
參考文獻071
第3章高效產甲烷菌群的建立/079
3.1主要儀器和試劑085
3.1.1主要儀器085
3.1.2主要試劑086
3.2實驗設計和方法087
3.2.1實驗設計087
3.2.2實驗方法089
3.3實驗結果與討論090
3.3.1溫度和壓力的模擬繫統氣密性和安全性分析090
3.3.2YH5和TH2的配比分析及HYH5的建立092
3.3.3產甲烷菌群HYH5降解石油的分析095
3.3.4溫度和壓力對HYH5降解石油烴產甲烷的影響100
3.4本章小結104
參考文獻106
第4章混合菌中單菌鋻定及混合菌培養條件的優化/111
4.1主要儀器和試劑112
4.1.1主要儀器112
4.1.2主要試劑112
4.2實驗設計和方法112
4.2.1實驗設計112
4.2.2實驗方法114
4.3實驗結果與討論117
4.3.1HYH5和YHH6混合菌群中單菌的分離鋻定117
4.3.2接種量對HYH5菌群的影響126
4.3.3初始pH值對HYH5菌群的影響126
4.3.4初始鹽度對HYH5菌群的影響127
4.3.5石油濃度對HYH5菌群的影響127
4.3.6采油劑聚丙烯酰胺對HYH5菌群的影響128
4.4本章小結129
參考文獻131
第5章生長激活劑對菌群產甲烷的影響/133
5.1主要儀器和試劑134
5.1.1主要儀器134
5.1.2主要試劑134
5.2實驗設計和方法135
5.2.1不同表面活性劑對HYH5混合菌群產甲烷的影響135
5.2.2不同碳源對HYH5菌群產甲烷的影響135
5.2.3鉬離子和鋅離子對HYH5菌群產甲烷的影響136
5.2.4硫酸根和硝酸根電子受體對HYH5菌群產甲烷的影響136
5.2.5YHH6副產物對HYH5菌群產甲烷影響137
5.3實驗結果與討論138
5.3.1不同表面活性劑對HYH5混合菌群產甲烷的影響138
5.3.2不同碳源對HYH5菌群產甲烷的影響139
5.3.3鉬離子和鋅離子對HYH5菌群產甲烷的影響140
5.3.4硫酸根和硝酸根電子受體對HYH5菌群產甲烷的影響140
5.3.5紅外光譜和高效液相色譜分析YHH6副產物142
5.3.6YHH6副產物對HYH5菌群產甲烷的影響143
5.4HYH5厭氧產甲烷菌群的應用144
5.5本章小結145
參考文獻146
第6章降解石油烴產甲烷的機理初探/149
6.1主要儀器和試劑151
6.1.1主要儀器151
6.1.2主要試劑151
6.2實驗設計和方法151
6.2.1實驗設計151
6.2.2實驗方法152
6.3實驗結果與討論153
6.3.1HYH5菌群降解同位素標記的甲苯153
6.3.2HYH5菌群降解鏈烴的分析157
6.4本章小結158
參考文獻158
第7章結論及展望/160
7.1結論161
7.2展望162
附錄/164
附錄1：紫外分光光度法測定采出水中總氮165
附錄2：DNA提取儀器設備168
附錄3：DNA提取步驟168
附錄4：DGGE標準操作方法169
附錄5：降解菌的生理生化特性實驗170
附錄6：細菌基因組DNA提取試劑盒使用方法172
附錄7：基因組DNA及PCR產物瓊脂糖電泳174
附錄8：原油四組分分離方法175
