●1引言
1.1苜蓿概況
1.2苜蓿屬牧草**外育種研究進展
1.3苜蓿屬牧草基因工程研究進展
1.3.1紫花苜蓿基因工程研究進展
1.3.2黃花苜蓿基因工程研究進展
1.3.3轉基因苜蓿安全性問題
1.3.4轉基因苜蓿發展趨勢和應用前景
1.4CBF基因研究進展
1.4.1CBF基因簡介
1.4.2CBF基因結構關繫
1.4.3CBF基因的表達
1.4.4CBF基因作用機理
1.4.5**CBF基因的研究與應用
1.4.6國外CBF轉錄因子的研究與應用
1.4.7CBF轉錄因子的應用前景
1.5研究目的及意義
1.6研究內容及技術流程
2紫花苜蓿高效組培再生體繫建立
2.1材料
2.1.1供試植物材料
2.1.2培養基
2.2方法
2.2.1無菌苗培養
2.2.2外植體制備
2.2.3愈傷組織的誘導
2.2.4愈傷組織的繼代
2.2.5愈傷組織的分化
2.2.6生根培養
2.2.7評價指標
2.3結果與分析
2.3.1愈傷組織誘導培養基的選擇
2.3.2繼代培養基的選擇
2.3.3分化培養基的選擇
2.3.4外植體的選擇
2.3.5基因型的選擇
2.3.6苜蓿轉化植株的生根培養
2.4小結
2.5討論
2.5.1基因型對愈傷組織分化的影響
2.5.2外植體對愈傷組織分化的影響
2.5.3AgNO3對胚性愈傷率的影響
2.5.4TDZ對胚性愈傷率的影響
2.5.5KT對愈傷組織分化的影響
3擬南芥CBF1和CBF4基因克隆及植物表達載體構建
3.1材料
3.1.1擬南芥簡介
3.1.2擬南芥作為一種模式植物的優點
3.1.3大腸杆菌
3.1.4酶以及試劑
……
為研究冷誘導轉錄因子CBF1(C-repeat-binding-factor)基因對我國優良豆科牧草紫花苜蓿的抗寒性改良作用,本書以紫花苜蓿品種“中苜1號”、“公農1號”和“獵人河”為受體材料,采用農杆菌介導法將擬南芥冷誘導轉錄因子CBF1基因轉入其中獲得了轉基因紫花苜蓿植株,PCR和RT-PCR檢測結果表明目的基因CBF1已經整合至紫花苜蓿基因組中並在其轉錄水平表達,抗寒生理指標測定結果表明轉CBF1基因紫花苜蓿的抗寒性得到提高。這為下一步選育紫花苜蓿抗寒新品種奠定了良好的基礎。全書共分6部分,主要內容包括:紫花苜蓿高效組培再生體繫建立;擬南芥CBF1和CBF4基因克隆及植物表達載體構建;紫花苜蓿農杆菌遺傳轉化及轉化植株的分子生物學檢測;轉基因紫花苜蓿抗寒性鋻定。本書具有較強的繫統性和創新性,可作為研究苜蓿組織培養和遺傳轉化等本科生和研究生的參考教材,也可供相關專業科研和教學參考。