農業微生物實驗守則1







章微生物的培養技術3



實驗一微生物基礎培養基的配制3



實驗二固氮微生物選擇性培養基的配制7



實驗三微生物鋻別性培養基的配制8



實驗四無菌操作及微生物接種技術11



實驗五微生物實驗常用消毒與滅菌技術18







第二章微生物純種分離技術22



實驗六土壤中微生物的分離培養22



實驗七水中細菌總菌落數的測定25



實驗八解磷菌和聚磷菌的篩選29



實驗九雙孢蘑菇培養料中纖維素降解菌的分離與純化34



實驗十苯酚生物降解菌的篩選38



實驗十一產表面活性劑菌的篩選42



實驗十二外生菌根真菌的分離與純化44







第三章微生物菌株的形態學特征觀察與測定47



實驗十三四大類微生物菌落及細胞形態的觀察47



實驗十四細菌的塗片及簡單染色法52



實驗十五細菌的革蘭氏染色54



實驗十六細菌芽孢、莢膜的染色及觀察58



實驗十七比色法測微生物的生長曲線61



實驗十八微生物數量的測定63



實驗十九微生物大小的測定67







第四章微生物菌株的鋻定實驗71



實驗二十大分子物質的水解實驗71



實驗二十一糖發酵實驗74



實驗二十二IMViC與硫化氫實驗76



實驗二十三厭氧微生物的培養80



實驗二十四質粒DNA的提取86



實驗二十五16S rDNA序列鋻定細菌種類實驗89







第五章農業微生物應用實驗96



實驗二十六乳酸發酵與乳酸菌飲料制作96



實驗二十七酒精發酵及糯米甜酒的釀制100



實驗二十八食用菌栽培技術103



實驗二十九耐鹽堿自生固氮菌的分離與純化107



實驗三十植物葉際冰核細菌的分離、篩選109



實驗三十一常見藥用植物內生菌的分離、篩選112



實驗三十二堿性蛋白酶高產菌株的選育115



實驗三十三蘇雲金芽孢杆菌的分離及抑菌、殺蟲活性的鋻定119



實驗三十四微生物遺傳育種實驗——氨基酸營養缺陷型突變株的篩選123







附錄127



附錄1微生物實驗常用菌種及其學名127



附錄2常用培養基成分及其配制128



附錄3常用染色液和試劑的配制131



附錄4常用緩衝液配制表135



附錄5常用消毒劑表136







參考文獻138

農業的本質是開發利用生物資源。傳統農業是利用植物、動物資源形成“二維結構”。將傳統農業調整為植物、動物和微生物資源組成的“三維結構”新型農業，是實現農業現代化的戰略性調整之一。地球上三大生物資源之一的微生物資源是至今尚未充分開發利用的生物資源寶庫，應用高科技生物工程技術開發微生物資源，創立微生物產業化利用的工業型農業。這類新型農業是在潔淨生產車間內進行生產，人們穿戴白色工作服從事勞動，故有人形像地稱之為“白色農業”，與以水土為主的綠色植物生產——“綠色農業”和以海洋為主的水產農業——“藍色農業”並稱為三色農業。



農業微生物資源的開發利用對促進農業生產的變革具有明顯的現實意義和深遠的歷史意義，其必將成為世界各國政府和科技部門研究的重點。在當前研究中，應充分重視基礎理論研究，同時利用先進的生物技術手段，開發出優質的菌株與產品，為人類生活水平的提高和人類的可持續發展提供保證。



《農業微生物實驗技術》是為微生物學繫以外各專業(設施農業、植保、資源環境科學、園藝等)開設的一門介紹微生物學實驗技術的課程，涵蓋微生物學教學、基礎研究及應用研究必不可少的基本技術。其主要任務是使學生得到微生物學實驗技術的基本操作和技能的訓練，同時，也要使他們初步了解或掌握先進的技術和方法，與迅速發展的學科前沿接軌。



本書由張玉苗(濱州學院)主編，張洪勛(中喜生態產業股份有限公司)、範延輝(濱州學院)和張韓傑(濱州學院)副主編。在本書的編寫過程中，我們參考了國內外許多相關的教材和文獻資料，借鋻了一些前沿科研成果，在此向各位前輩和同行致以衷心的感謝。本教材還得到了學校、出版社的大力支持和幫助，在此一並表示衷心的感謝。書中若有不足之處，敬請專家和同行以及廣大讀者給予批評指正。







編者



2019年4月