了得網研究生_生物化學與分子生物學實驗技術(第3版)(胡瓊英)

實驗室規則
實驗記錄及實驗報告
生物化學實驗
實驗一緩衝液配制和pH值測定
實驗二分光光度計線性分辨範圍測定
實驗三3,5-二硝基水楊酸比色法測定糖的含量
實驗四RNA的提取與核酸的顏色反應
實驗五影響澱粉酶活性的一些因素
實驗六硫酸銨沉降法純化工業澱粉酶
實驗七葡聚糖凝膠色譜法脫鹽
實驗八澱粉酶活力的測定
實驗九Folin-酚比色法測定蛋白質含量
實驗十間隔法測定過氧化物酶的活力
實驗十一連續記錄法測定過氧化氫酶的活力實驗室規則

實驗記錄及實驗報告

生物化學實驗

實驗一緩衝液配制和pH值測定

實驗二分光光度計線性分辨範圍測定

實驗三3,5-二硝基水楊酸比色法測定糖的含量

實驗四RNA的提取與核酸的顏色反應

實驗五影響澱粉酶活性的一些因素

實驗六硫酸銨沉降法純化工業澱粉酶

實驗七葡聚糖凝膠色譜法脫鹽

實驗八澱粉酶活力的測定

實驗九Folin-酚比色法測定蛋白質含量

實驗十間隔法測定過氧化物酶的活力

實驗十一連續記錄法測定過氧化氫酶的活力

實驗十二2,6-二氯酚靛酚滴定法測定L-抗壞血酸的含量

實驗十三熒光光度法測定核黃素的含量

實驗十四茚三酮比色法測定賴氨酸含量

實驗十五考馬斯亮藍G-250比色法測定蛋白質含量

實驗十六紙電泳分離鋻定三種腺苷酸

實驗十七醋酸纖維素薄膜電泳法分離血清蛋白

實驗十八NBT光化還原法測定超氧化物歧化酶活性

實驗十九Eadie-Hofstee法測定辣根過氧化物酶的Km

實驗二十硫酸銨分級沉澱純化苯丙氨酸解氨酶

實驗二十一凝膠色譜法脫去PAL溶液中的硫酸銨

實驗二十二DEAE纖維素柱色譜法純化PAL

實驗二十三超氧化物歧化酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳

實驗二十四過氧化物酶同工酶的分析——等電聚焦電泳

實驗二十五過氧化氫酶和辣根過氧化物酶的色譜分離與電泳

實驗二十六1, 5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶提取及其Western雜交檢測

分子生物學實驗

實驗二十七用16S rDNA方法鋻定細菌種屬

實驗二十八植物基因組DNA的提取、純化與定量

實驗二十九DNA瓊脂糖凝膠電泳

實驗三十基因組DNA的酶切與檢測

實驗三十一質粒DNA的提取、純化與鋻定

實驗三十二目的基因PCR擴增

實驗三十三感受態細胞的制備及轉化

實驗三十四DNA測序

實驗三十五重組子的構建、篩選與鋻定

實驗三十六植物總RNA的提取、純化與檢測

自行設計實驗

實驗三十七工業澱粉酶的純化與分析

綜合性開放實驗

附錄

附錄一植物樣品的采取、處理與保存

附錄二常用緩衝溶液的配制

附錄三硫酸銨溶液飽和度計算表（0℃）

附錄四色譜顯色劑

附錄五常用凝膠及色譜用濾紙的規格和性能

附錄六玻璃儀器的洗滌及一些常用洗滌劑

附錄七移液器的使用

附錄八分光光度計

附錄九離心機

附錄十電泳設備

附錄十一pH計

附錄十二電子天平

附錄十三EDC-810型PCR儀

附錄十四實驗室安全及防護知識

生物化學實驗習題

生物化學實驗習題參考答案

前言

前言
生物化學實驗是生命科學研究的重要手段。學生通過生物化學實驗課程的學習，可加深對實驗原理的理解、鞏固理論知識、掌握生物化學實驗的技術、熟悉實驗室常用儀器和一些大型精密儀器的使用，從而為以後的專業課學習以及生產、科研工作打下一個良好的基礎。
《生物化學與分子生物學實驗技術》（第三版）是在前兩版教材的基礎上，進一步結合我校生物學教學實驗中心資深教師的實踐教學經驗，對原教材做了大量修正編寫而成的。本版教材更加注重培養學生在定量、定性實驗操作中的科學性、嚴謹性。通過本課程的學習，可以培養學生分析問題、解決問題的能力，激發學生對科學實驗的興趣。
為了使學生通過有限的實驗課程學到更多的實驗技能，在將來的工作或科研中少走彎路，編者將幾十年實驗教學的經驗和體會融入了本教材。本書會讓學生對實驗過程中的每一步驟怎樣操作、為什麼這樣操作，有一個較為清晰的理解。本書對學生以及科研工作者都是一本有益的工具書。前言

生物化學實驗是生命科學研究的重要手段。學生通過生物化學實驗課程的學習，可加深對實驗原理的理解、鞏固理論知識、掌握生物化學實驗的技術、熟悉實驗室常用儀器和一些大型精密儀器的使用，從而為以後的專業課學習以及生產、科研工作打下一個良好的基礎。

《生物化學與分子生物學實驗技術》（第三版）是在前兩版教材的基礎上，進一步結合我校生物學教學實驗中心資深教師的實踐教學經驗，對原教材做了大量修正編寫而成的。本版教材更加注重培養學生在定量、定性實驗操作中的科學性、嚴謹性。通過本課程的學習，可以培養學生分析問題、解決問題的能力，激發學生對科學實驗的興趣。

為了使學生通過有限的實驗課程學到更多的實驗技能，在將來的工作或科研中少走彎路，編者將幾十年實驗教學的經驗和體會融入了本教材。本書會讓學生對實驗過程中的每一步驟怎樣操作、為什麼這樣操作，有一個較為清晰的理解。本書對學生以及科研工作者都是一本有益的工具書。

本教材內容包括蛋白質、糖類、脂類、核酸、氨基酸、酶和維生素的提取、分離、電泳、色譜、光譜法檢測及分子雜交等定性定量技術。本教材的每個實驗後面都附有思考題及答案，便於學生和研究人員在學習和科研中參考。本書可供理工科高等院校的生命科學、生物技術、生物工程及農林院校的農學、林學、植保、資源環境、園藝、食品、理學等各專業的本科生使用，可以作為“生物化學實驗”、“分子生物學實驗”等課程的教材和參考書。

本教材的出版得到了南京農業大學的蘇業瑜、葉茂炳、徐朗萊等教授以及生命科學院領導、實驗教學中心領導的大力支持和幫助；生物基地51班的張亮、齊繼艷、陳舟舟和生命基地62班的張艷紅同學以及生物基地91班的牟尚婕、牛靜、龍若吟、朱非凡等同學對部分實驗內容進行了探究、改進與驗證，謹此深表謝意！

鋻於作者水平有限，書中不足之處，歡迎廣大師生提出寶貴意見。

編者

南京農業大學

第二版前言

生物化學與分子生物學實驗技術是生物化學的重要內容，也是生物科學研究的重要方法和手段。學生通過生物化學與分子生物學實驗，理解實驗原理，進一步鞏固生物化學與分子生物學的理論知識，並且掌握生物化學與分子生物學實驗的基本方法和技術，熟悉實驗室常用儀器和一些大型精密儀器的使用，從而為以後的專業課學習以及生產、科研工作打下一個良好的基礎。

《生物化學與分子生物學實驗》一書是在第一版《生物化學實驗》的基礎上，結合本校多年的實驗教學經驗和廣大師生的建議，對原教材做了必要的修改。增添了一些新的實驗內容、習題及答案。在附錄中整理和翻譯了“常用儀器性能指標及使用說明”、“緩衝溶液的配制”、“植物樣品的采集、處理及保存”等資料。本教材包括蛋白類、糖類、脂類、核酸、氨基酸、酶和維生素的提取、分離、電泳、層析、光譜法檢測及分子雜交等定性定量技術，以鍛煉學生的基本實驗技能，同時培養學生綜合實驗、設計實驗的創新能力。

本書可供理工科高等院校的生物科學、生物技術、生物工程及農林院校的農學、林學、植保、資環、園藝、食品、理學等各專業的本科生使用。可以作為《生物化學實驗》、《生物化學分析》、《分子生物學實驗》等課程的教材和參考書。

本教材多年來得到了南京農業大學的蘇業瑜、葉茂炳、徐朗萊等教授以及生命科學院院領導、實驗教學中心領導的大力支持和幫助；還有生物基地51班的張亮、齊繼艷、陳舟舟和生命基地62班的張艷紅同學的積極參與，謹此深表謝意！歡迎廣大師生提出寶貴意見。

編者

2010年5月

南京農業大學

第一版前言

生物化學實驗技術不僅是生物化學的重要內容和理論基礎，也是生物科學研究的重要方法和手段。學生通過生物化學實驗，不僅可以進一步鞏固生物化學的基本理論，了解實驗原理，還能熟悉生物化學實驗的基本方法和技術以及許多大型精密儀器的使用，從而為以後的專業課學習以及生產、科研工作打下良好基礎。

《生物化學實驗》供理工科高等院校的生命科學、生物技術、生物工程及農林院校的農學、林學、植保、資環、園藝、食品、理學等各專業的本科生使用，要求學生學會蛋白類、糖類、脂類、核酸、氨基酸、酶和維生素的分離提取、定量測定或定性鋻定等方法；掌握電泳、層析、離心和光譜法檢測等技術；培養學生綜合性、設計性實驗創新能力。

本書在南京農業大學生命科學院編寫的《生物化學實驗指導》講義基礎上，又吸取了該校多年的教學、科研、開發工作中的經驗和廣大學生的建議，對原教材內容進行了必要的修改，重新編寫了這本《生物化學實驗》教材，並補充了許多新的實驗內容，便於學生自學。我們還增設了“自行設計實驗”、“綜合性選做實驗”和“綜合性開放實驗”，鼓勵和培養學生自己動手、開發創新的精神。在附錄中，我們還整理和翻譯了有關“常用儀器性能指標及使用說明”、“緩衝溶液的配制”、“植物樣品的采集、處理及保存”等內容，為從事綜合性生物化學實驗的師生們提供方便。

本教材多年來得到了蘇業瑜、葉茂炳、周培根、徐朗萊、戚曉玉各位教授和歐瑜等老師以及生命科學院領導、實驗教學中心領導的大力支持和幫助；還有生物基地51班的張亮、齊繼艷、陳舟舟和王瀟同學的積極參與，謹此深表謝意！鋻於作者水平有限，歡迎廣大師生提出寶貴意見。

編者

2007年3月

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