第1章  馬鈴藷無性繁殖中的莖尖剝離 001

1.1莖尖剝離的意義 001

1.2莖尖分生組織培養脫毒原理 002

1.3適合馬鈴藷莖尖剝離的四種培養基 003

1.4馬鈴藷莖尖剝離 003

1.4.1莖尖剝離程序 003

1.4.2剝離前的準備 005

1.4.3培養基制作 006

1.4.4普通培養條件 006

1.4.5組培苗需檢測的病害 007

1.4.6變溫和藥物鈍化處理 008



第2章  馬鈴藷病毒病、類病毒病和細菌性病害的檢測 015

2.1雙抗體酶聯免疫吸附法(DAS-ELISA) 015

2.1.1采樣 015

2.1.2雙抗體酶聯免疫吸附法操作規程 017

2.1.3雙抗體酶聯免疫吸附法病毒含量判定標準和依據 021

2.2馬鈴藷病原芯片檢測法 024

2.3馬鈴藷紡錘塊莖類病毒的往復聚丙烯氨酰胺凝膠電泳檢測技術 025

2.3.1試劑及制備 025

2.3.2操作步驟 026



第3章  馬鈴藷組織培養 029

3.1馬鈴藷組培的基礎設施 029

3.1.1無菌室 029

3.1.2緩衝間 030

3.1.3組培苗培養室 031

3.1.4自然采光節能型組培室 032

3.1.5病毒檢測室 034

3.1.6綜合實驗室 034

3.1.7培養基制作室 035

3.1.8盥洗室和儲存室 036

3.2無菌室、緩衝間和組培室的統籌管理 036

3.2.1空氣和環境消毒 037

3.2.2超淨臺注意事項 037

3.2.3工作人員注意事項 039

3.2.4分苗程序 039

3.2.5分苗方法和健壯組培苗所需的生長空間 041

3.3培養基制作 043

3.3.1MS培養基配方 043

3.3.2培養基的滅菌 044

3.3.3培養基的灌裝 045

3.3.4培養基凝固劑的選用 046

3.4品種資源保存 047

3.4.1品種資源室的管理 048

3.4.2搶救污染試管苗的方法 048

3.5組培室管理 049

3.5.1溫度 049

3.5.2濕度 050

3.5.3光照長度和強度 051

3.5.4空氣與容器封口 051

3.5.5環境衛生 052

3.5.6控制易造成組培苗污染的關鍵環節 052

3.6組培部門的規章制度 053

3.6.1無菌分苗室制度 053

3.6.2培養基配制制度 055

3.6.3環境衛生管理制度 055

3.7馬鈴藷組培苗生產中的經驗和技巧 056

3.7.1甘露醇的應用 056

3.7.2硫代硫酸銀（STS）的應用 057

3.7.3植物激素的應用 058

3.7.4挑根技術 059

3.7.5培養器皿的選擇 059

3.7.6培養基中凝固劑的使用 060

3.7.7組培瓶的封口 060

3.8馬鈴藷組培苗不正常現像 061

3.8.1無菌蟲害—蔥薊馬 061

3.8.2組培苗莖稈出現黑褐條紋斑點 063

3.8.3組培苗莖稈出現淺黃褐色小鼓包 064

3.8.4彎鉤組培苗 065

3.8.5爛頭苗 065

3.8.6強光低溫對組培苗的冷灼傷 066

3.8.7組培苗葉片發黃 067

3.8.8組培苗隻長莖，不長葉片莖稈顏色有深有淺 068

3.8.9培養溫度過低的組培苗 069

3.8.10組培苗基部長氣生藷 069

3.8.11光弱苗細 070

3.8.12紫外線灼傷的組培苗 071

3.8.13二氧化氯消毒劑危害的組培苗 071

3.8.14化學材料稱樣不準確導致苗不正常 071

3.8.15組培苗葉片出現小黃點狀的愈傷顆粒 072

3.8.16組培苗葉片上出現黑斑成片的癥狀 072

3.8.17甲基杆菌屬粉紅色細菌的感染 073

3.9組培苗內生菌感染 074



第4章  馬鈴藷脫毒微型藷生產程序 079

4.1無土栽培的苗床準備和相配套的園藝措施 080

4.1.1苗床準備 080

4.1.2培養基質的準備 081

4.1.3配套的園藝措施 082

4.1.4大棚和溫室外圍的要求 083

4.2組培苗的種植程序 084

4.2.1組培苗移栽方法 084

4.2.2生根劑處理 086

4.2.3移栽和扦插組培苗注意事項 086

4.3苗源的建立和利用 088

4.4微型藷生產的日常管理 091

4.4.1溫度 091

4.4.2光照 093

4.4.3水與濕度 095

4.4.4營養液和施肥 098

4.4.5水的pH值和EC值 100

4.4.6空氣 102

4.5微型藷的病蟲害防治 103

4.6生長異常的案例分析 104

4.6.1氮肥過量 104

4.6.2素 105

4.6.3肥害 106

4.6.4缺水造成卷葉和失水萎蔫 106

4.6.5苗水分和光照管理不到位 108

4.6.6溫差造成植株生長點灼傷 109

4.6.7通風不當造成幼苗灼傷 110

4.6.8苗期低溫缺水導致生長異常 110

4.6.9陰天露珠使葉片上產生斑點 111

4.6.10組培苗移栽深度對發根的影響 112

4.6.11組培苗苗齡對發根的影響 112

4.6.12苗床存水，澆水過大導致生長異常 113

4.6.13溫度高，水澆得偏多導致生長異常 114

4.6.14低溫高濕導致生長異常 114

4.6.15氣生藷 115

4.6.16根據植株的長勢判斷生長環境溫度是否偏低 115

4.6.17藥害 116

4.6.18移栽苗感染絲核菌 117

4.6.19微型藷塊莖畸形 117

4.6.20微型藷生理缺陷 118

4.6.21收獲時微型藷塊帶芽 118

4.6.22瘡痂病 119

4.6.23微型藷塊莖糖末端 119

4.6.24儲存時缺氧的微型藷 120

4.6.25儲存時受冷害的微型藷 121



參考文獻 122

馬鈴藷是糧菜兼用的農作物，也是食品制作和工業加工的原料。馬鈴藷耐寒、耐旱、耐瘠薄，適應性廣，種植起來更為容易，屬於“省水、省肥、省藥、省勁”的“四省”作物，大部分地區均可種植。馬鈴藷營養較為全面，有“地下面包”之稱，有營養學家說，“每餐隻喫馬鈴藷和全脂牛奶就可獲得人體所需要的全素”。經過幾十年的研究與開發，以馬鈴藷為原料的加工產品得到了空前發展，目前全世界主要的馬鈴藷加工產品有：藷片、藷條、全粉（雪花粉和顆粒粉）、藷塊、澱粉、罐頭、去皮藷、藷粒、藷酥、沙拉及化工產品（如乙醇、茄堿、卡茄堿、乳酸）等。但主要的加工產品仍為澱粉、藷片（天然藷片）、藷條和全粉（顆粒粉和雪花粉）。馬鈴藷便於種植，加上其營養價值高及具有加工優勢，這些有力地促進了馬鈴藷種植面積的擴大，常年種植面積從20世紀80年代初的4300萬畝，已增至目前的7300萬畝，居世界首位，為我國四大農作物之一。

馬鈴藷作為無性繁殖的作物，無一例外地要受到病毒的侵染，一旦受到侵染，其自身排除不了，還會遺傳給下一代，所以帶有病毒的馬鈴藷不可以作為種源進行繁殖。馬鈴藷病毒影響馬鈴藷的正常生長，破壞葉片的光合作用和生理代謝，從而造成減產，影響成品藷質量。因此，為馬鈴藷市場提供脫毒的馬鈴藷原原種（脫毒微型種藷），成為種藷產業健康延續基本、基礎的需求。

馬鈴藷種藷的生產，首先由國內外育種專家，有性雜交育出優良品種，精心栽培結出實生種子，進行實生苗後代選擇，選出農藝性狀好、產量高、品質好的後代形成藷塊。

在此基礎上，采用植物生物技術，保持育種專家所育品種的優良性狀，生產原原種。這就是本書要敘述的內容，大致包含以下三部分：

一是將藷塊進行莖尖剝離形成脫毒無菌試管苗，采用雙抗體酶聯免疫吸附法（DAS-ELISA）與生物芯片等檢測手段，檢測剝離出來的試管苗是否含有造成馬鈴藷性狀退化的病毒、類病毒或其他病菌，若通不過檢測，需再次或多次莖尖剝離，剝出更小的葉原基，用藥物和高低溫鈍化處理，直到重復檢測3次，均為陰性反應，此類苗纔是脫病毒無菌試管苗，有了這樣的核心基礎苗，即可以用於產業化生產。本書第1章馬鈴藷無性繁殖中的莖尖剝離及第2章馬鈴藷病毒病、類病毒病和細菌性病害的檢測，介紹了這一部分的具體操作過程及技術要點。

二是有了核心組培苗，采用農業生物技術，在無菌室剪切植株組培，剪切帶一片葉的莖節，扦插在MS培養基上，一株苗可以擴繁育出來4或5株苗，可以擴繁多次，直到達到生產計劃所需的數量。本書第3章馬鈴藷組織培養有詳細的敘述。一般的種藷企業大都從其他單位引進核心苗，自這一階段開始擴繁，到生產各級種藷。

三是將組培瓶內的苗撥出來移栽到苗床上，采用無土栽培的方法管理，給予合適的溫度、光照、營養液、水和通風等條件，90天左右結出脫毒微型種藷，為馬鈴藷的原原種。本書第4章馬鈴藷脫毒微型藷生產程序為這部分的設施和管理要素提供了具體的參考。

在整個種藷產業中，脫毒微型種藷的生產是整個產業的龍頭，基礎中的基礎，尤為重要。隨著馬鈴藷種植面積的擴大，馬鈴藷種藷生產企業的數量和規模也在增長，各個企業所掌握的原原種生產技術參差不齊。本書從莖尖剝離、檢測、組培到微型藷生產，描述了整個微型藷生產的程序，並將三十年來筆者在生產中遇到的問題和累積的經驗與同行們分享，希望對大家有所啟示，為馬鈴藷產業的健康發展盡綿薄之力。



居玉玲

2022年1月