章微生物形態觀察與測定技術

實驗１光學顯微鏡的使用

實驗２細菌染色技術

實驗３放線菌形態觀察

實驗４真菌形態觀察

實驗５微生物細胞大小的測定

實驗６微生物細胞的顯微鏡直接計數

實驗７微生物細胞的稀釋平板計數法

實驗８或然數（ＭＰＮ）法測定微生物數目

第二章培養基制備和滅菌消毒技術

實驗９培養基制備

實驗１０常用微生物消毒方法

實驗１１微生物滅菌技術

第三章微生物的分離與培養技術

實驗１２微生物的分離與純化

實驗１３好氧微生物的培養

實驗１４厭氧微生物的培養

實驗１５生長曲線的測定

第四章環境因素對微生物生長的影響

實驗１６物理因素對微生物生長的影響

實驗１７化學因素對微生物生長的影響

第五章環境微生物的豐度與多樣性分析

實驗１８土壤微生物總ＤＮＡ的提取

實驗１９１６ＳｒＤＮＡ的ＰＣＲ擴增

實驗２０ＤＧＧＥ法分析微生物多樣性

實驗２１１６ＳｒＤＮＡ繫統發育樹的構建

實驗２２熒光定量ＰＣＲ檢測微生物的豐度

第六章微生物與環境監測

實驗２３水體中細菌總數和大腸菌群數的檢測

實驗２４空氣中微生物的計數

實驗２５發光細菌的毒性實驗

實驗２６土壤中各生理類群微生物的檢測

第七章微生物菌種保藏技術

實驗２７菌種的簡易保藏

實驗２８冷凍真空干燥保藏

實驗２９液氮超低溫冷凍保藏

附錄

附錄１培養基配方

附錄２或然數法測數統計表

參考文獻

    微生物學是一門實驗性較強的科學，其基本理論和知識內容均源於實驗，同時，微生物學實驗技術和方法在整個生命科學技術的發展中占有重要地位。所以，觀察和分析一些實驗現像是學生真正理解和掌握微生物學知識內容的主要方式之一。而且，學習和掌握微生物學的基本實驗技術和方法是培養學生實驗技能及觀察和分析問題能力的重要途徑，有助於學生適應畢業後科研教學及相關工作的需要。

    近年來，微生物學研究進入了分子生物學發展階段，微生物學實驗技術和方法也已廣泛地滲透到環境科學領域的研究中，一個新的理論研究體繫———環境微生物學逐漸形成並得到快速

發展，這一體繫作為一門跨越微生物學、環境科學和環境工程等學科的綜合性學科，所包含的內容層次較多，無論在理論研究上還是在實際應用上，都要求有更新穎和實用的配套微生物學實驗教材做基礎。編者在傳統微生物學實驗教材的基礎上，根據多年的教學和研究實踐，參考國內外的相關教材，針對２１世紀教學改革和學科發展的需要，對實驗內容重新整合、精選，編寫了這本《環境微生物學實驗基礎》教學指導教材。

    《普通高等院校環境科學與工程類繫列規劃教材·環境微生物學實驗基礎》一書的實驗內容主要考慮到以下幾方面：

    １.兼顧基礎性和先進性的要求，盡可能涵蓋微生物學的重要基礎實驗內容，如常見微生物種群形態結構的顯微觀察、培養基的配制和滅菌，微生物的純培養技術、無菌操作技術等，並適當結合一些較新的研究技術，如１６ＳｒＤＮＡ序列的擴增和繫統進化樹的構建、ＤＧＧＥ
（變性梯度凝膠電泳）
和熒光定量ＰＣＲ等。

    ２.環境微生物學在環境類學科教學體繫中具有的重要作用，所選的實驗內容適當結合環境科學專業（學科）
現有的研究項目特點，如水體、食品、空氣等細菌學檢查、環境因素對微生物的影響等。

    ３.從鍛煉學生的科學思維角度出發，書中每個實驗後都設置了一些思考題，這些思考題的選擇既強調了對基本操作技術的掌握，又設置了與實驗相關的具有啟發性和探討性的問題，使學生在學習知識的同時又能開拓思路、啟發創新，正所謂“授人以魚不如授人以漁”，使學生具備在生產實踐中主動發現問題，並運用自己所學到的知識和技能獨立分析和解決問題的能力。

    我們希望本實驗教材的出版不僅能夠使學生掌握一些微生物學研究的主要技術和方法，還能夠培養學生獨立觀察實驗現像以及分析問題的能力，激發他們的科研興趣，培養嚴肅認真與實事求是的科學態度。

    本書是由多個院校的一線教師共同編寫的，所寫內容均為自己所熟悉的教學或科研領域。本書可作為高等院校環境科學和環境工程等專業的實驗教學用書，也可作為微生物學及相關專業的實驗課教材，還可作為相關科技人員的參考用書。由於水平和時間所限，編排過程中難免存在疏忽和失誤，誠懇讀者和同行專家提出寶貴意見。