上篇  噬菌體表面展示技術原理及其操作指南

第1章  概述

  一、噬菌體表面展示隨機肽庫

  二、噬菌體抗體庫

  三、噬菌體表面展示技術篩選原理和基本方法

  四、噬菌體表面展示技術的應用

第2章  噬菌體表面展示肽庫技術操作指南

  一、試劑

  二、實驗步驟

  三、影響篩選的因素

  四、結果判斷和分析

第3章  噬菌體肽庫構建及篩選實例

  實例1  基於昆蟲防御素A蛋白分子的噬菌體展示構像肽庫的構建

  實例2  重組hTNF-α結合肽的篩選

  實例3  馬抗SARS-CoV多抗抗原表位的篩選

第4章  噬菌體抗體庫技術操作指南

  一、試劑

  二、實驗步驟

  三、影響篩選的因素

第5章  噬菌體抗體庫構建及篩選實例

  一、引物

  二、淋巴細胞總RNA的提取及VH和VL基因的擴增

  三、初級噬菌體抗體庫的構建

  四、通過Cre-loxP位點特異性重組構建大容量噬菌體抗體庫

  五、噬菌體抗體庫的篩選

  六、噬菌體抗體的鋻定及序列分析

下篇  SELEX技術原理及其操作指南

第1章  概述

  一、SELEX技術的基本技術路線

  二、SELEX篩選的特點

  三、SELEX的應用

  四、適配子的改造

第2章  SELEX技術操作指南

  一、試劑與設備

  二、文庫/文庫模板和引物的設計與合成

  三、RNA文庫的獲得（PCR、體外轉錄與RNA回收）

  四、文庫與靶分子孵育

  五、結合寡核苷酸分子的分離

  六、反轉錄

  七、PCR

  八、下一輪篩選用文庫的制備

  九、重復篩選

  十、篩選後獲得的特異aptamer的分析

第3章  SELEX技術篩選實例

  實例1  牛凝血酶特異的RNA aptamer的篩選

  實例2  CE-SELEX篩選技術

  實例3  親和層析SELEX篩選促紅細胞生成素適配體及基於分子信標檢測方法的建立

  實例4  親和層析SELEX篩選相思子毒素適配體及其在分析檢測中的應用

  實例5  以完整細胞為靶的消減SELEX篩選

  實例6  腫瘤組織切片-SELEX技術篩選臨床標本分子探針

  實例7  組合aptamer用於金黃色葡萄球菌檢測的研究