章解表劑/

一、桂枝湯/

二、麻黃湯/

三、葛根湯/

四、小青龍湯/

五、麻黃附子細辛湯/

六、桂枝芍藥知母湯/

七、射干麻黃湯/

八、桂枝加厚樸杏子湯/

九、大青龍湯/

十、麻黃連翹赤小豆湯/

第二章攻下逐邪劑/

一、大承氣湯/

二、桃核承氣湯/

三、抵當湯/

四、大陷胸湯/

五、三物白散/

六、十棗湯/

七、大黃附子湯/

八、大黃硝石湯/

九、大黃牡丹皮湯/

十、葶苈大棗瀉肺湯/

目錄

第三章和解劑/

一、小柴胡湯/

二、大柴胡湯/

三、柴胡桂枝湯/

四、柴胡桂枝干姜湯/

五、柴胡加龍骨牡蠣湯/

六、柴胡加芒硝湯/

七、半夏瀉心湯/

八、甘草瀉心湯/

九、生姜瀉心湯/

第四章溫陽散寒劑/

一、理中湯（丸）（人參湯）/

二、四逆湯/

三、附子湯/

四、吳茱萸湯/

五、大建中湯/

六、瓜蔞薤白白酒湯/

第五章清熱瀉火劑/

一、黃芩湯/

二、葛根芩連湯/

三、白虎湯/

四、麻杏石甘湯/

五、茵陳蒿湯/

六、大黃黃連瀉心湯/

七、白頭翁湯/

八、麥門鼕湯/

第六章理氣活血劑/

一、四逆散/

二、大黃蟄蟲丸/

三、下瘀血湯/

四、半夏厚樸湯/

五、當歸芍藥散/

六、桂枝茯苓丸/

七、當歸四逆湯/

八、溫經湯/

九、旋覆代赭湯/

十、黃芪桂枝五物湯/

第七章利水祛濕劑/

一、五苓散/

二、真武湯/

三、苓桂術甘湯/

四、豬苓湯/

五、小半夏湯/

六、小半夏加茯苓湯/

七、茵陳五苓散/

八、澤瀉湯/

九、桂枝去桂加茯苓白術湯/

十、防己黃芪湯/

第八章補益劑/

一、小建中湯/

二、芍藥甘草湯/

三、甘麥大棗湯/

圖書在版編目（CIP）數據

張仲景方劑實驗研究 / 彭鑫, 王洪蓓主編.—3版.—北京：中國醫藥科技出版社, 2018.12（張仲景醫學全集）

 
ISBN 978-7-5214-0584-2

Ⅰ.①張…Ⅱ.①彭…
②王…Ⅲ.①《傷寒雜病論》—方劑—研究Ⅳ.①R222.16

中國版本圖書館CIP數據核字(2018)第261832號

美術編輯陳君杞

版式設計易維鑫

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初版2005年1月第1版

版次2018年12月第3版

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書號ISBN 978-7-5214-0584-2

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章

解表劑

一、桂枝湯

（一）桂枝湯與體溫調節

1.對體溫的調節作用本方具有較強的解熱作用，除了能促進汗腺分泌外，還與鎮靜作用及中樞性降溫作用有關。實驗證明\\[1\\]，口服給藥對酵母所致的大鼠發熱有顯著的解熱效果，作用時間持續5h以上，對正常大鼠體溫也有降低作用，作用時間4h以內，亦呈明顯的量效關繫。能對耳靜脈注射霍亂、傷寒、副傷寒甲乙四聯菌苗的家兔的肛溫下降至正常以下，即降低其升高溫度的126.3%，而麻黃湯僅降低其升高溫度的63.8%。\\[2\\]說明本方降溫效果比麻黃湯迅速；60min降溫達值，下降達其升高溫度的145.6%，後略有回升，與麻黃湯作用強度基本相同。對小鼠正常皮膚溫度，腹腔給藥有降低的作用，但與麻黃湯相比，作用較緩慢。對本方解熱作用的劑量，時間與效應關繫進行繫統的研究\\[1，3\\]，結果表明本方的解熱作用存在著劑量-效應和時間-效應之間的關繫，並認為降溫作用可能與體溫調節繫統有直接關繫。解熱實驗表明\\[4\\]，75%桂枝湯能使發熱家兔肛溫降低0.71℃，皮溫實驗也可使小鼠正常皮膚溫度降低8.13%。取本方：桂枝、芍藥、生姜、大棗各10份，炙甘草7份，常規制成水煎濃縮液備用，觀察其對動物體溫和腸蠕動的雙向調節作用\\[5\\]，結果表明：2.5～10g/kg劑量的桂枝湯口飼大鼠，能使酵母引起的發熱和安痛定引起的體溫降低迅速恢復正常，8.75～35g/kg口飼大鼠，能抑制新斯的明引起的腸蠕動功能亢進，興奮腎上腺素引起的腸蠕動減慢，這種對體溫和腸蠕動的雙向調節作用和正常化作用，為桂枝湯調節陰陽功能提供了一個實驗例證。

在腦室注射乙酰膽堿前1h口飼桂枝湯的大鼠，給乙酰膽堿後，體溫曲線明顯下移，第1h體溫有顯著下降，以後逐漸回升，2h後略高於基礎體溫，與對照組有顯著性差異（P＜0.01），說明桂枝湯能抑制下丘腦性乙酰膽堿所致的體溫升高。\\[6\\]還有人用鮮酵母皮下注射使大鼠體溫升高，5～6h後達高峰，維持10h以上，在體溫升高達峰值前給予桂枝湯，能抑制致熱大鼠的體溫持續升高，並加速退熱，藥後第7h，使體溫基本正常，有量效相關性。\\[7\\]腦室注射小劑量蛙皮素後，肛溫顯著下降，1h內下降2.4℃，2h後恢復到正常水平。桂枝湯灌胃的大鼠，再腦室注射蛙皮素，雖也有肛溫下降，但下降幅度顯著減弱，1h內平均下降1.36℃，並很快恢復到正常水平，說明桂枝湯能對抗蛙皮素的降溫作用。\\[8\\]給予去甲腎上腺素（NE）的大鼠，體溫急劇下降，15min時平均降低2.38℃，以後即較快回升，40min時尚低於正常對照0.4℃，在注射NE前1h口飼桂枝湯的大鼠，體溫也有較大下降，但降溫幅度明顯減少，與單純給予NE的造型對照組有顯著性差異（P＜0.01），說明桂枝湯在一定的程度上能拮抗過量NE引起的降溫作用。\\[6\\]

章解表劑

2.對體溫調節作用機制的研究

（1）腦內五羥色胺（5-HT）與體溫調節有實驗觀察桂枝湯對5-HT腦室注射誘致發熱的影響：給予桂枝湯的大鼠，可使5-HT誘致的發熱基本得到控制，其體溫曲線與注射人工腦脊液的正常對照組相似，所測各點的肛溫值均與單純注射5-HT組有顯著性差異。進一步觀察桂枝湯對高體溫和低體溫大鼠下丘腦中5-HT含量的影響：桂枝湯對酵母致熱大鼠有顯著降溫作用，對安痛定誘致的體溫低下有升溫作用。在體溫改變的峰值時測得的下丘腦5-HT含量，亦呈現雙向性變化：酵母致熱大鼠下丘腦5-HT含量升高，低體溫動物下丘腦5-HT含量則顯著降低；給予桂枝湯後，發熱大鼠下丘腦中5-HT含量降低，低體溫動物下丘腦中5-HT含量升高，分別向正常水平方向起調節作用。\\[9\\]

為進一步探討桂枝湯對下丘腦組織中5-HT的影響，同時測定了5-HT代謝產物5-HIAA的含量，發現發熱大鼠下丘腦中5-HIAA含量較正常對照組有所下降。5-HT與5-HIAA的比值為120.43，比正常對照組121.04明顯下降；給予桂枝湯，5-HIAA數值有所升高，使兩者比值升為122.03，提示桂枝湯促進了5-HT的代謝。在低體溫大鼠，兩者的比值為122.27，給予桂枝湯，5-HIAA含量進一步降低，兩者的比值為120.89，接近正常。實驗經2次重復，結果相似。

桂枝湯能抑制5-HT腦室注射引起的發熱，能降低發熱動物下丘腦5-HT含量，能升高低體溫動物下丘腦的5-HT含量，同時亦伴有體溫的相應變化，說明桂枝湯的解熱作用以及它對體溫的雙向調節作用，有體溫中樞神經遞質5-HT的參與。\\[9\\]

（2）對下丘腦神經降壓素和促腎上腺皮質激素作用的影響桂枝湯對神經降壓素作用的影響：在環境溫度20℃條件下，大鼠腦室注射〔D-Tyr”〕-NT1μg/隻，15min後體溫急劇降低，平均下降接近3℃，1h後體溫降到點，達-3.54±0.35℃，以後逐漸回升，TRI4.0為-10.48±1.71。腦室注射NT前1h口飼10g/kg桂枝湯的大鼠，雖示有相似的降溫曲線，但降溫曲線明顯上移，1h前後，體溫少下降1.1℃左右，TRI4.0為-7.38±1.48，同單純給NT相比（P＜0.05），提示桂枝湯能部分拮抗NT的降體溫作用。

桂枝湯對促腎上腺皮質激素（ACTH）作用的影響：大鼠腦室注射ACTH後，在0.5h內體溫即顯著下降，平均降低2.66±0.68℃，以後即較快恢復，TRI1.67為-2.70±0.68。腦室注射ACTH前1h口飼桂枝湯，也有與ACTH相似的降溫曲線，雖然降溫幅度略小於對照降，峰值-2.16±0.54℃，TRI1.67為-2.09±0.86，但經統計學處理，兩者無顯著性差異，說明10g/kg桂枝湯口飼並不影響ACTH的降體溫作用。\\[10\\]

（3）對大鼠下丘腦PGE2含量及COX活性的影響有實驗研究本方對高體溫和低體溫大鼠下丘腦和血漿中前列腺素E2（PGE2）含量的影響，以及對PGE2腦室注射誘發致熱的影響。結果表明:灌胃給予桂枝湯10g/kg，可使酵母致熱大鼠的體溫下降，使安痛定引起體溫低下大鼠的體溫升高。用放射免疫法測定下丘腦和PGE2含量，在發熱動物中，桂枝湯灌胃使PGE2水平下降；在體溫低下動物中，桂枝湯使PGE2升高。灌胃給予桂枝湯對PGE2腦室注射誘發致熱的大鼠，也有快速解熱作用。提示桂枝湯可能通過促進或抑制中樞發熱介質PGE2的代謝而參與對體溫的雙向調節。\\[11\\]

（4）對大鼠下丘腦中腺苷酸環化酶和磷酸二酯酶活性的影響桂枝湯對體溫的雙向調節是部分通過影響體溫調節中樞中cAMP含量來實現的。由於cAMP含量受腺苷酸環化酶（AC）和磷酸二酯酶（PDE）活性的影響，故推斷發熱及低體溫動物下丘腦中cAMP含量的增減必然有AC或PDE活性的相應變化。藥物桂枝湯經生藥學鋻定，其原植物分別為桂枝、芍藥、甘草、生姜、大棗，按10∶10∶7∶10∶10的重量比例混合，加水浸泡1h，煮沸45min，頭煎過濾取渣，再加8倍的水煮沸30min，過濾合並濾液並水浴濃縮，4℃冰箱保存，臨用時配制。實驗中對低體溫模型及發熱模型大鼠，桂枝湯用量分別為10g/kg、20g/kg，選取基礎體溫（36.6±0.5）℃的大鼠，10%鮮酵母懸液2ml/100g背部皮下注射誘導體溫升高，正常組大鼠注射同體積生理鹽水，3.5h後測體溫。選取體溫升高1℃以上的造模成功大鼠，隨機分為2組，即發熱模型組（簡稱發熱組）和桂枝湯組。桂枝湯組大鼠灌胃給予200%桂枝湯1ml/100g。正常組及模型組大鼠給予同體積生理鹽水，1h後重復給藥1次，劑量同前。首次給藥後4h測體溫，並計算體溫升高差值（藥後體溫值-基礎體溫值），繼而將大鼠快速斷頭取腦（1min內完成），干冰速凍，於-20℃冰箱保存，備作下丘腦AC、PDE活性的測定。選取基礎體溫（36.6±0.5）℃的大鼠，隨機分為3組，即正常組、低溫模型組（簡稱低溫組）、桂枝湯組，桂枝湯組大鼠灌胃給予100%桂枝湯1ml/100g，正常組及低溫組大鼠給予同體積生理鹽水，1h後重復給藥（或生理鹽水）1次，劑量同前。低溫組第2次灌胃後立即腹腔注射安痛定2.2ml/kg誘致體溫下降。正常組大鼠注射同體積生理鹽水，腹腔注射後2.5h後測體溫，並計算體溫降低差值（基礎體溫值-腹腔注射後2.5h體溫值），繼而將大鼠快速斷頭取腦（1min內完成），干冰速凍，於-20℃冰箱保存，備作下丘腦AC、PDE活性的測定。AC和PDE活性的測定：取冷凍腦組織，剝離下丘腦（以灰結節及視交叉的中心點確定下丘腦），稱取60mg左右加入預冷的1ml勻勻漿介質（50mmo1/L TrisHCl，5mmol/L MgSO4，pH 7.5），在玻璃勻漿器內於冰浴中制成勻漿，1000r/min離心10min，取0.5ml上清PDE活性測定用，剩餘勻漿加入預冷的50mmol/L Tris-Maleate緩衝液（含5mmol/L MgSO4，pH 7.4）0.5ml重懸，取混合均勻的粗酶液供AC活性測定用。AC的活性測定按文獻的方法進行酶反應，產物cAMP測定按cAMP試劑盒說明書操作，測得cpm值根據標準曲線可算出每分鐘每毫克組織分解ATP生成cAMP的量為其活性單位。PDE活性測定按文獻方法進行酶反應，後酶的活性用每分鐘每毫克組織水解cAMP的百分轉化率表示。統計學方法采用t檢驗。結果：桂枝湯對酵母誘導大鼠體溫升高有顯著的降低作用，對安痛定誘導的體溫降低有顯著的回升作用，給藥後體溫及體溫變化差值與模型組比較差異均有顯著性，表明桂枝湯可使發熱、低體溫大鼠分別向正常水平方向進行調節。桂枝湯對酵母誘導發熱大鼠下丘腦中AC活性有顯著的降低作用，而對安痛定誘導的低體溫大鼠下丘腦中AC活性有顯著升高的作用。但桂枝湯對兩種模型大鼠下丘腦中PDE活性影響不明顯。認為桂枝湯對發熱、低體溫動物下丘腦中cAMP含量的雙向調節主要是通過其對下丘腦中AC活性雙向性影響來實現的。\\[12\\]

（5)對蛙皮素作用的影響

①桂枝湯在正常動物對蛙皮素及其受體拮抗劑作用的影響研究表明腦室注射人工腦脊液的大鼠對照組，肛溫曲線基本維持在正常水平。腦室注射小劑量蛙皮素後，同文獻報道一致，肛溫顯著下降，1h內下降2.4℃，2h後恢復到正常水平。桂枝湯灌胃的大鼠，再腦室注射蛙皮素，雖也有肛溫的下降，但下降幅度顯著減弱，1h內平均下降1.36℃，並很快恢復到正常水平。說明桂枝湯能對抗蛙皮素的降溫作用。同時給予蛙皮素和蛙皮素受體拮抗劑的大鼠，雖也有短暫的肛溫下降，但下降幅度較小（1h內平均下降0.74℃），1.5h即恢復到正常水平。對同時給予蛙皮素及其受體拮抗劑的動物，給予桂枝湯，並不影響其肛溫曲線。\\[13\\]

②桂枝湯在發熱動物中對蛙皮素及其受體拮抗劑作用的影響測定動物的基礎體溫後，立即以滅菌生理鹽水配制的20%新鮮酵母混懸液（2ml/100g體重）皮下注射大鼠背部，致熱後3.5h，選擇體溫升高1℃以上的動物，隨機分成4組，每組8～9隻。第1組為發熱對照組，第2組為蛙皮素受體拮抗劑組，第3組為桂枝湯組，第4組為蛙皮素受體拮抗劑加桂枝湯組。第3、4組灌胃給予桂枝湯，第1、2組給予相同體積蒸餾水；1h後，分別腦內注射蛙皮素受體拮抗劑或注射等體積的人工腦脊液，同時再1次灌胃給予桂枝湯或水。腦室注射後，立即將動物移置於4℃冷環境中，1h後，定時測量肛溫。

發熱對照組在腦室注射人工腦脊液後，肛溫繼續上升，平均上升1.03℃；給予蛙皮素拮抗劑，肛溫上升更高，幅度超過對照組；給予桂枝湯的發熱動物，肛溫雖繼續略有上升，但升溫幅度僅0.5℃，與對照組相比有顯著性差異；接受蛙皮素受體拮抗劑的大鼠，給予桂枝湯，其發熱曲線顯著低於單純接受蛙皮素受體拮抗劑組。按矩形法求發熱曲線下的面積，如以發熱對照組的值為100%，拮抗劑組則為121.7%，桂枝湯組為27.7%，拮抗劑加桂枝湯組為55%，說明桂枝湯的解熱作用機制與其對下丘腦蛙皮素受體的作用有關。\\[13\\]

（6）桂枝湯有效部位A（Fr.A）對體溫雙向調節作用及其機制的研究

Fr.A對體溫的雙相調節作用\\[11\\]：研究發現，Fr.A對大鼠體溫的影響，酵母組體溫明顯高於正常對照組，用Fr.A後體溫則明顯降低，並趨向正常，但量效間無明顯的趨勢。提示該有效部位具有解熱作用。

安痛定組體溫明顯低於正常對照組，用Fr.A後，體溫則明顯回升。提示該有效部位可使低體溫動物體溫升高。

實驗結果示：Fr.A對高、低體溫的影響：Fr.A對酵母致大鼠體溫升高有顯著的降低作用，對安痛定誘致的體溫降低有顯著的升高作用，體溫變化值與模型組比較均有顯著性差異，表明Fr.A可使高、低體溫分別向正常水平方向進行調節。

Fr.A對體溫調節的機制研究：Fr.A對下丘腦PGE2含量的影響：PGE2的提取和測定：將冷凍的腦組織取出，剝離出下丘腦（以灰結節及視交叉之間的中心點為中心確定下丘腦），加無水乙醇0.4ml，輕研磨，再加生理鹽水1.6ml，研磨制成勻漿，取適量進行Lowry蛋白定量，其餘勻漿液離心，取上清液1ml，加0.1mol/L HCl 0.1ml，加重蒸餾乙酸乙醋等試劑提取，按放免試劑盒操作說明書的方法測定PGE2的含量。酵母組PGE2含量明顯高於正常對照組，安痛定組則明顯低於正常對照組；使用Fr.A以後，則可使酵母模型升高的PGE2降低，也可使安痛定模型降低的PGE2升高，兩者均使PGE2趨向正常。\\[11\\]

對下丘腦NE、多巴胺（DA）、5-HT含量的影響：以灰結節及視交叉之間的中心點為中心確定下丘腦位置，稱取一定量的下丘腦組織，以熒光分光光度法測定下丘腦NE、DA、5-HT的含量。統計學處理下丘腦NE、DA、5-HT的含量以ng/mg組織濕重表示。結果：酵母組大鼠下丘腦組織中NE和DA含量均顯著高於正常對照組，灌胃給予Fr.A可使下丘腦組織中NE和DA含量降低，與模型組比較有顯著性差異。安痛定模型組及給藥組與正常組對比無明顯變化。下丘腦組織中5-HT含量隨體溫的改變而改變，酵母組大鼠5-HT含量升高，安痛定組5-HT含量降低；給予Fr.A後，發熱大鼠下丘腦中5-HT含量降低，低體溫動物下丘腦中5-HT含量升高。\\[14\\]

對下丘腦三磷酸肌醇(IP3)、鈣調蛋(CaM)白含量的影響：實驗結果，Fr.A對大鼠高、低體溫的影響：Fr.A對酵母致大鼠體溫升高有顯著的降低作用，對安痛定誘致的體溫降低有顯著的回升作用，體溫變化差值與模型組比較均有顯著性差異，表明Fr.A可使高、低體溫動物體溫分別向正常水平方向進行調節。

Fr.A對大鼠下丘腦IP3含量的影響：酵母模型組大鼠下丘腦IP3含量明顯低於正常對照組，Fr.A在解熱的同時，亦可使下丘腦IP3含量回升；安痛定模型組動物下丘腦IP3含量明顯升高，Fr.A在促使體溫回升的同時，使下丘腦IP3含量下降。

Fr.A對大鼠下丘腦CaM含量的影響：酵母性發熱大鼠下丘腦CaM含量降低，安痛定性低體溫大鼠CaM含量升高；Fr.A則可逆轉高、低體溫大鼠下丘腦CaM含量的變化——使高體溫大鼠下丘腦CaM含量升高，低體溫大鼠CaM含量降低。

Fr.A對酵母致熱大鼠下丘腦IP3和CaM的降低及安痛定誘致低體溫大鼠下丘腦IP3和CaM含量的升高均有明顯的逆轉效應，表明Fr.A可通過對細胞內信息傳遞繫統的影響對體溫進行雙向調節。\\[15\\]

對下丘腦和隔區血管加壓素（AVP）及下丘腦神經降壓素（NT）含量的影響：酵母模型組大鼠下丘腦和隔區組織中AVP含量均顯著高於正常對照組，灌胃給予Fr.A，可使隔區AVP含量下降，接近正常水平，對下丘腦組織中AVP含量無影響。安痛定模型組大鼠下丘腦和隔區組織中AVP含量均明顯降低，灌胃給予Fr.A。Fr.A可拮抗安痛定這一作用，使下丘腦和隔區組織中AVP含量回升，尤其對下丘腦AVP含量影響明顯。模型組大鼠下丘腦NT顯著高於正常對照組，Fr.A在使體溫下降的同時，可使下丘腦NT含量降低；安痛定模型組大鼠下丘腦NT含量明顯低於對照組，Fr.A可拮抗安痛定這一作用，使下丘腦NT含量回升。提示Fr.A可抑制AVP和NT的釋放和利用。\\[16\\]

對下丘腦熱休克蛋白的影響：從分子生物學的角度，更深層次揭示桂枝湯雙向調節作用的機制，探討Fr.A在調節體溫的同時，對熱應激刺激誘導的下丘腦組織中HSP70含量的影響。選取基礎肛溫在（36.5±0.5）℃範圍的大鼠，以致熱原鮮酵母懸液背部皮下注射（2.4g/kg體重）誘致體溫升高，3.5h後測肛溫，選取肛溫升高≥0.8℃者，隨機分為3組，即正常對照組、酵母模型組和酵母 Fr.A 7.6mg/kg組。灌胃給藥，對照組及模型組給同體積蒸餾水，1h後，重復給藥1次，劑量同前。第1次給藥後2h，測肛溫，並計算肛溫升高差值（藥後2h肛溫值-基礎肛溫值）。另選取基礎肛溫在（36.5±0.5）℃範圍的大鼠，隨機分為3組，即正常對照組、安痛定模型組和安痛定 Fr.A7.6mg/kg組。灌胃給藥，對照組及模型組給同體積蒸餾水，1h後，重復給藥一次，劑量同前，同時腹腔注射解熱鎮痛藥安痛定2.2ml/kg（對照組注射同體積蒸餾水）誘致體溫下降。在注射安痛定後1.5h，測肛溫，並計算肛溫降低差值（藥後肛溫值-基礎肛溫值）。動物檢測肛溫後，立即斷頭處死，迅速取腦，干冰速凍，-70℃保存備用。取冷凍大鼠下丘腦組織約50mg，加勻漿緩衝液（Tris-Cl 50mmol/L，0.1%SDS，0.2mmol/LDTT，4%BME，10%甘油，pH7.4）0.7ml.12000r/ min室溫離心10min，收集上清，各取勻漿上清液20μl，用Lowry法進行蛋白定量，餘樣品-70℃保存備用。Western Blot雜交分析，將制備的樣品蛋白進行電泳（8.5%SDS-PAGE），按每一樣品60μg蛋白量上樣，電泳完畢後，將凝膠進行電轉移至醋酸纖維素膜上，然後將膜置於3%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩衝液（PBS）中封閉過夜（4℃），再分別與抗體（1∶1000）反應1h，用PBS液洗3次，每次10min，再將膜置於1∶100的辣根過氧化酶標記的IgG第二抗體中反應1h，同法洗3次，與ECL顯影發光，用X光片記錄影像。用UVI凝膠圖像掃描儀對X光影像進行掃描記數，以各帶掃描記數值進行統計學處理。結果，Fr.A對酵母致大鼠體溫升高有顯著的降低作用，對安痛定誘致的體溫降低有顯著的回升作用，體溫變化值與模型組比較均有顯著性差異（P＜0.05），表明Fr.A可使高、低體溫動物體溫分別向正常水平方向進行調節。Fr.A對熱休克蛋白的影響：HSP70蛋白的確定：經計算條帶Rf值為0.2325，分子量為69.1，HSP70分子量為70KD，故本計算結果與之相符，也與所購試劑要求相符。Fr.A對HSP70蛋白含量的影響：安痛定具有降低HSP70含量的作用，Fr.A則具有明顯的拮抗安痛定性低體溫大鼠下丘腦HSP70含量降低的作用；酵母具有升高大鼠下丘腦HSP70含量的趨勢，Fr.A對酵母性發熱大鼠下丘腦HSP70含量具有降低作用。提示Fr.A對酵母性發熱和安痛定性低體溫大鼠下丘腦HSP70含量具有一定的調節作用。\\[17\\]

（7）桂枝湯及方中單味藥對體溫雙向調節作用的研究\\[18\\]

實驗前將動物置於實驗條件下適應3～5天，室溫控制在（22±1）℃，動物采用顆粒飼料，分籠飼養。實驗前及當天同一時間（8 ∶00 AM）用體溫計測大鼠的基礎體溫，即將測量探頭插入大鼠的直腸內約3cm，待體溫恆定後讀取體溫值，單次體溫超過38.3℃或2次溫差＞0.5℃者，剔除不用，取2次平均值記為正常體溫。取鮮酵母以0.9%生理鹽水配成3%鮮酵母混懸液，按2ml/100g體重的量大鼠背部皮下注射，引起局部無菌性炎癥，3～3.5h後測大鼠直腸溫度，選取體溫升高值ΔT≥0.8℃者供實驗用，然後分組口飼給藥，對照組給相等體積的蒸餾水，觀察藥後1、2、3、4、5、6、7h體溫變化情況。選取基礎體溫在36.8～38℃者，隨機分組，以1.43ml/kg體重的劑量給大鼠靜注安痛定，造成體溫低下模型，靜脈注射同時給予規定劑量藥物或同體積的蒸餾水，至低溫後0.5、1、2、3、4、5、6h各測體溫1次。繪制各組的平均體溫變化曲線，計算出體溫反應指數（TRI即按E梯形法求得的溫度-時間曲線下面積F，右下角數字指計算到幾小時）。體溫反應高度（ΔT，正值代表體溫升高值，負值代表體溫降低的值）實驗數據均以x±s表示，進行組間t檢驗。

結果：體溫雙向調節作用：大鼠在經酵母致熱後6h左右，體溫達到高峰，以後逐漸下降，至熱後10hΔT仍≥1℃，桂枝湯5g/kg、10g/kg兩個劑量組雖有相似的升溫曲線，但升溫幅度明顯減弱，體溫反應指數TRI6顯著下降，ΔT在發熱高峰時，分別與對照組比較有顯著差異。大鼠在給予安痛定靜注後1h內體溫即顯著下降，平均降低1℃以上，2h達到高峰，以後逐漸恢復；桂枝湯2個劑量組雖有相似的降溫曲線，但降溫曲線明顯上移,ΔT與TRI6與安痛定對照組比較有顯著性差異。故桂枝湯可促使酵母所致發熱大鼠體溫降低，安痛定所致低溫大鼠體溫回升，對體溫呈現雙向調節作用。

桂枝湯中各組藥味的體溫調節作用：桂枝、芍藥的大、中、小3個劑量組使酵母所致發熱大鼠體溫降低，其平均體溫反應高度ΔT3與對照組相比有顯著性差異；此二藥的3個劑量組也促使安痛定所致低體溫大鼠體溫回升，ΔT3和TRI6與對照組比較具有顯著性差異，說明該藥對體溫呈現雙向調節作用。

生姜對酵母所致發熱大鼠體溫升高無明顯抑制作用，而大劑量組可明顯促進安痛定所致低體溫大鼠的體溫回升，藥後4～6h,ΔT或TRI6與對照組比較有顯著性差異，說明該藥有單向促進體溫回升的作用。

大棗的大劑量組對酵母所致發熱大鼠體溫的升高有抑制作用，與對照組比有顯著性差異。但在給藥劑量範圍內對低體溫大鼠的體溫回升未表現任何作用，說明該藥具有一定單向解熱作用。

炙甘草大、中2劑量對酵母所致發熱大鼠體溫升高有抑制作用，TRI7與對照組比有顯著性差異。小劑量未呈現解熱作用。該藥量對安痛定所致低體溫大鼠體溫降低有抑制作用，ΔT或TRI4與對照組比有顯著性差異。提示該藥對體溫呈現一定雙向調節作用。

本實驗結果提示，方中君藥桂枝、臣藥芍藥既能解熱又能使體溫加速恢復，甘草亦呈一定的雙向作用；然生姜僅能促進低體溫恢復，大棗僅有較弱的解熱作用，可能桂枝湯對體溫的雙向調節是方中諸藥共同作用的結果。值得一提的是，在單味藥的研究中，我們所用的小劑量僅為該藥在全方（相當於臨床等效量）中的用量，用量較低，一般在小劑量時已顯示作用；但將它們的用量加大4倍，接近全方總量時，它們對體溫的起效時間、作用強度或維持時間均不如全方，說明諸藥有機組合成方的作用優於各個單味藥物。

（二）對汗腺分泌的調節\\[19\\]

（1）桂枝湯對正常大鼠足跖部汗腺分泌的影響桂枝湯能增強正常大鼠的汗液分泌，具有發汗作用。

（2）桂枝湯對感染流感病毒小鼠汗腺分泌的影響給藥組除小劑量組外，中、大劑量組均能使汗腺分泌較感染對照組增加，在正常小鼠汗點均值上下波動，說明其在一定病程階段，使之維持在正常水平。

（3）桂枝湯對汗腺分泌亢進大鼠汗腺分泌的影響給予桂枝湯的各劑量組在所測時間點上，汗點數均比單純造型組有明顯減少，和正常對照組相比，無顯著性差異，說明桂枝湯對汗腺分泌亢進動物有抑制作用，並使之降低到正常水平。

（4）桂枝湯對汗腺分泌抑制大鼠汗腺分泌的影響給桂枝湯的造型動物，汗腺分泌都有所增加，所測各劑量組的相應時間點，均與單純造型組有顯著性差異，並有量效相關，提示桂枝湯能使汗腺分泌抑制大鼠的汗腺分泌增加。

（三）對免疫功能的雙向調節作用

本方可以提高小鼠巨噬細胞吞噬率及吞噬指數，同時，根據Ashman和Ellingson提出的體溫升高，巨噬細胞活動能力隨之增強的觀察結果，證實了原方“啜粥溫覆”的科學性，並采用不同給藥時間分組觀察，發現每日服2～3劑或每日1劑連服數日的效果，與仲景“後服小促其間”、“不愈更服”的記載一致。還可增加抗體及提前產生抗體。\\[20\\]按8.75 g/（kg·d）、17.5 g/（kg·d）和35.0g/（kg·d）劑量喂飼正常或感染流感病毒小鼠，5天後測定發現，感染病毒的小鼠，無論是單核巨噬細胞繫統（RES）的吞噬功能（K值）或單核巨噬細胞的吞噬活性（α值），還是肝、脾、胸腺、腎上腺重量，均較正常對照組明顯降低；由於病毒在肺部感染，形成肺實變，肺指數值顯著升高。感染病毒後的小鼠經本方治療後，RES吞噬活性顯著提高，K值、α值達到或甚至超過正常水平，並呈量效關繫，肝重也有一定的恢復，肺指數則顯著下降。但對正常小鼠，本方則無上述作用。\\[21\\]

通過正交設計，對促進病鼠RES吞噬活性的研究發現∶大棗作用強，其次為甘草；大棗、生姜、芍藥同甘草有協同作用，桂枝、生姜間也有協同作用；而芍藥有拮抗大棗的作用。還證明，全方能顯著促進病鼠RES吞噬活性，其作用均高於方中諸藥味的各種組合。任何兩藥相伍時，以姜草、桂草和姜棗作用強；無明顯作用的桂芍，伍有效的草棗作用強；有效的桂棗，伍有效的草芍或姜芍，作用增強；有效的姜草，佐無效的桂芍，作用被拮抗；有效的姜草、桂草和芍草，分別佐有效的桂棗、芍姜和桂姜，作用反相互抵消；桂芍草三藥伍大棗有效，佐生姜則不呈現作用；桂芍姜三藥伍大棗有效，佐生姜則不呈現作用；桂芍姜三藥伍大棗有效，佐甘草又不呈現作用。在維持被流感病毒感染小鼠脾髒重量上，僅大棗有作用，而芍藥則明顯降低脾重量；桂枝能促進芍藥的降脾髒作用，而甘草拮抗大棗的效應。全方對病鼠脾髒無明顯影響，但全方若缺芍藥，或僅用姜棗，脾重較全方明顯增加；姜棗伍以芍草，前者的作用被拮抗；姜草或桂姜草，伍大棗能較全方增重，佐芍藥則不呈現效應。\\[22\\]

通過玫瑰花結形成細胞（RFC）和空斑形成細胞（PFC）試驗，證明本方有抑制T細胞和B細胞效能。家兔異體皮移植實驗表明，經本方浸泡後皮片同對照組相比，可顯著延長其存活期，但不如單獨使用免疫抑制劑硫唑嘌呤和潑尼松。\\[23\\]以每天8.75～35.0g/kg劑量的桂枝湯口飼小鼠，對正常小鼠血清溶血素（Ⅰ）、血清凝集素（Ⅱ）水平和ANAE（ ）淋巴細胞比率（Ⅲ）均無明顯影響。但感染流感病毒4天後的小鼠，Ⅰ、Ⅱ的水平和Ⅲ的比率比正常動物均顯著降低；給予上述劑量的桂枝湯，則均能顯著提高Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，使之達到正常水平。給小鼠左旋咪唑25mg/kg，均可使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ顯著提高；給予桂枝湯後，又均能使之下降，恢復到正常水平。實驗證明，桂枝湯對循環抗體水平和T、B淋巴細胞比率的偏亢或受抑的動物，有明顯的雙向調節使之正常化的作用。\\[24\\]本方能明顯抑制小鼠的抗體分泌空斑形成細胞（PFC）、特異玫瑰花結形成細胞（SRFC）、牛血清白蛋白（BSA）誘導的遲發型超敏反應，以及對刀豆球蛋白（ConA）和細菌脂多糖（LPS）的增殖反應，與對照組相比，有顯著性差異（P＜0.01）；還可明顯抑制小鼠脾細胞產生IL-2的能力，與對照組相比，有顯著性差異（P＜0.01）。\\[25\\]

（四）抗炎、抗菌、抗病毒作用

取桂枝湯按傳統配伍比例10 ∶10 ∶7 ∶10和大棗4枚（10g），藥料混合，煎成濃液150%，進行如下實驗：對小鼠流感病毒性肺炎的作用；抗炎癥作用；鎮痛作用；降溫作用。結果表明：給動物口飼桂枝湯煎劑，能緩解流感病毒性肺炎，抑制急性炎癥的滲出過程，具有鎮痛、解熱等作用，並有顯著的量效關繫。\\[2\\]本方對多種感染性及非感染性炎癥均有顯著作用。實驗表明，給小鼠腹腔注射7.5g/kg，能明顯抑制甲醛所致的小鼠足腫脹，給藥1h即顯效，維持時間可達24h以上。\\[1\\]對於角叉菜膠性小鼠足腫脹，本方也具有顯著的抑制作用，並且有顯著的量效關繫。\\[2，7，26\\]

通過正交設計，就本方對角叉菜膠性足腫脹進行組方分析。研究證明，致炎後1h，本方單味藥中，桂枝抗炎作用強，甘草次之；大棗、生姜能促進桂枝的作用，生姜也能促進甘草的效果。致炎後的4h，仍以桂枝的作用為強，大棗次之；芍藥、大棗同甘草有協同作用，芍藥同桂枝也有協同作用。在炎癥的第1小時，任何兩藥相伍，以姜棗、桂草兩藥抗炎作用明顯，但二藥相合，則彼此的抗炎作用拮抗抵消。無效的芍、草配伍，有效的姜棗作用強；芍姜棗三藥配伍甘草有效，佐桂枝反不呈現作用。在炎癥的第4小時，以桂棗、桂草芍藥的抗炎作用強，桂芍伍以姜棗，作用強於任何四藥味相伍。認為本方的抗炎作用以君藥桂枝做主導。\\[14\\]以抗炎的藥效法進一步研究麻黃湯、桂枝湯、銀翹散、桑菊飲的藥物動力學表明，桂枝湯與其他三方均能顯著抑制致炎劑二甲苯引起的小鼠皮膚毛細血管通透性增高，並呈顯著的量效關繫。\\[27\\]

桂枝湯對大鼠佐劑性關節炎癥的防治作用\\[28\\]：40隻大鼠隨機分為4組，參照文獻造模。結果，大鼠致炎後6～8h，致炎部位顯著腫脹，於24h至高峰。桂枝湯高、低劑量和芬必得各給藥組動物的致炎部位色呈現腫脹，但在所測的各時間點，其腫脹程度均顯著低於模型組，腫脹高峰出現在12h。各給藥組間和桂枝湯兩劑量組間各點腫脹程度均無顯著差異。桂枝湯對AA大鼠繼發性關節炎的防治作用實驗結果：對於AA大鼠繼發性足腫脹，各給藥組動物在致炎後第11天的腫脹度值雖低於模型組，但無統計學意義；致炎後第15天和第19天，各給藥組動物的腫脹度均顯著低於模型組。提示桂枝湯和芬必得在試驗所用劑量水平，能顯著抑制AA大鼠的繼發性腫脹，其中桂枝湯的高劑量組作用似強於低劑量組。提示桂枝湯對佐劑性關節炎大鼠的抗炎作用與其對免疫功能的調節有關。

另有實驗提示：桂枝湯治療豚鼠變應性鼻炎的作用機制為通過提高體內cAMP含量，降低cGMP含量，抑制介質釋放，減輕和緩解局部癥狀。\\[29\\]

抗菌作用\\[30\\]：實驗藥物為市售桂枝、白芍、甘草、生姜各80g，按比例配制而成。桂枝湯以《傷寒論》的配方為準（桂枝10g，白芍10g，甘草3g，生姜10g，大棗4枚）。取胸苷-磷酸（TMP）100mg微熱溶於5ml蒸餾水中，然後加入桂枝湯中，制備成TMP桂枝湯混合液，其中桂枝湯與TMP的濃度分別為4×103g/L、20g/L。

實驗結果表明，桂枝湯中以甘草的抑菌效果強，桂枝和白芍居中，而以生姜弱。桂枝湯先伍後煎與先煎後伍的抑菌效果完全相同。

TMP與桂枝湯合用，對變形杆菌、枯草杆菌的抑菌作用明顯增強，分別提高了4倍和8倍；對表皮葡萄球菌、鏈球菌、綠膿杆菌和大腸杆菌的抑菌作用亦有所增強，提高了1倍，而對金黃色葡萄球菌抑菌作用反而減弱。

分別將桂枝湯中甘草量提高1倍（桂枝湯1），桂枝和白芍量各減少一半（分別為桂枝湯2和桂枝湯3）來研究比例改變對其抑菌作用的影響。結果其抑菌作用均得到不同程度的提高，其中以增加甘草量的效果，而分別減少桂枝和白芍的結果基本一致。

體外實驗還表明，桂枝湯煎液對幽門螺旋菌和幽門彎曲菌、金黃色葡萄球菌、傷寒杆菌、結核杆菌，均有較強的抑制作用，特別是較好地殺傷和消除幽門螺旋菌和幽門彎曲菌，從而起到預防和治療慢性腎炎和潰瘍病的作用。

體內抗病毒實驗結果表明，在感染病毒前1天起每日口服不同劑量的本方煎劑，連續5天，能明顯抑制流感病毒所致小鼠肺部病變的發展，使感染鼠肺指數降低，並呈量效關繫，在感染病毒後口服本煎劑，也能延緩和減輕流感病毒性肺炎的發生和發展。\\[21\\]

桂枝湯含藥血清的抗病毒作用\\[31、32\\]：單次給藥1h、2h、3h後采血結果表明：單次給藥1h、2h、3h後所采集的血清以及正常血清和病毒感染組比較均有顯著差異，提示前二者均有抑制病毒致細胞病變的作用；各含藥血清和正常血清比較無差異；水煎藥液組和病毒感染組比較無差異。

每日1次連續3天給藥1h、2h、3h後采血結果經統計學處理顯示：每日1次連續3天給藥1h、2h、3h後所采集的血清組以及正常血清和病毒感染組比較有顯著差異，提示前二者均有抑制病毒致細胞病變的作用；和正常血清組比較，2h采集的血清有顯著差異，而和其他時間血清比較無差異。水煎藥液組和病毒感染組比較無差異。

從兩次實驗結果均可看出，桂枝湯水煎劑本身並無直接抗副流感病毒作用，而口飼桂枝湯後的含藥血清則有明顯作用，這種現像正是建立中藥血清藥理學的出發點。桂枝湯對病毒致細胞病變作用的影響：按本實驗室的方法，將桂枝湯以細胞維持液稀釋後，（pH=6.0），進行體外抗病毒實驗，觀察桂枝湯對病毒致細胞病變作用的影響。結果顯示，桂枝湯4mg生藥/ml對副流感病毒-I、AdV3、AdV7以外的7株病毒致細胞病變有不同程度的抑制效果，當濃度增至8mg生藥/ml時，對所試10株病毒均有不同程度的抑制作用。

大鼠含桂枝湯血清對病毒致細胞病變作用的影響：取大鼠，按體重隨機分為3組。分別灌胃給予桂枝湯煎劑20g/kg 1次，同樣劑量的桂枝湯連續3天，正常對照組給予同體積的蒸餾水。大鼠於采血前禁食不禁水16h。采血當日，於末次藥後1h、2h，在無菌條件下自腹主動脈采血，分離血清，置-20℃冰箱保存備用。將Hep-2細胞單層感染50TCID50病毒後，加入不同稀釋度的大鼠血清，每個稀釋度接種4孔，逐日以倒置顯微鏡觀察血清對病毒致細胞病變作用的影響。同時設病毒對照、血清對照、正常細胞對照。正常大鼠血清1 ∶4稀釋後，對HSV-I、HSV-Ⅱ、CoxB4、B5的致細胞病變有延緩作用；當血清稀釋到1 ∶8時，這種作用消失。單次或連續3天喂飼桂枝湯後1h的大鼠血清1 ∶4稀釋後，對HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ、CoxB4、B5病毒的致病變作用均有延緩作用。給藥後2h的血清對病毒致細胞病變作用似與藥後1h的血清無顯著差異。

大鼠含桂枝湯血清保存時間對HSV-Ⅰ病毒致細胞病變作用的影響：取同份含藥血清分成2份，均保存在-20℃冰箱，1份保存3天，1份保存3個月，1∶4稀釋後，添加到已感HSV-Ⅰ病毒的Hep-2細胞中，於病毒感染後48、72、96h觀察細胞病變的進展情況。結果表明，正常大鼠血清保存3個月後，其抗病毒作用似有所下降，提示其活性在-20℃保存下仍能降解失活。給藥血清保存3個月，其抑制病毒致細胞病變作用依舊，提示其活性相對穩定。

血清滅活是含藥血清制備技術規範化研究中需要解決的問題之一，有人觀察了滅活對含桂枝湯兔血清藥效的影響，取已長成單層的Hep-2細胞板，用100TCID50的副流感病毒攻擊，1h後棄去病毒液，加相應的血清，同時設病毒對照組和正常細胞對照組。含桂枝湯兔血清滅活前後對副流感病毒-1型致細胞病變效應（CPE）作用的影響：含桂枝湯兔血清滅活後抑制副流感病毒-1致CPE的作用明顯降低，正常血清及1次給藥采集的含藥血清滅活後時間-藥效曲線下面積降低約50%左右；2次給藥後采集的含藥血清滅活後時間-藥效曲線下面積降低約35%左右。含桂枝湯兔血清滅活前後對抑制副流感病毒-1致CPE作用有效時間點的影響：滅活前後各種方案制備的含藥血清所反映的有效時間點不受影響。\\[33\\]

進一步觀察給藥劑量及給藥次數對含桂枝湯大鼠血清藥效的影響：含藥血清的制備：取大鼠若干隻，稱體重隨機分組，每組3～5隻。在采血前禁食不禁水12h以上。分單次給藥、2次給藥。大鼠1次灌胃（單次給藥）或分2次灌胃（2次給藥，間隔1h）給予桂枝湯5g/kg（相當於臨床等效劑量）、10g/kg（相當於臨床等效劑量的2倍）；末次藥後0.5、1、2、3、4、6、8、12h將動物用乙醚麻醉，以無菌方法從腹主動脈采血，置無菌試管內，待凝固後置4℃冰箱過夜，離心，分離血清。同時設正常大鼠血清對照（給予與藥液同體積的蒸餾水）、陽性對照藥病毒血清對照（口飼病毒唑0.07g/kg）。含藥血清對HSV-1致CPE作用的影響：將長成單層Hep-2細胞的96孔細胞微量培養板的細胞培養液倒掉，每孔添加含100TCID50的HSV-Ⅰ液50μl，置37℃，5%CO2培養箱吸附1h，倒掉病毒液，以細胞維持液洗細胞面2次，每孔添加用維持液稀釋的不同時間采集的含藥血清1 ∶12 100μl，每份血清添加4孔細胞，置37℃,5% CO2培養箱孵育72h，每日以倒置顯微鏡觀察CPE的進展情況，以-、±、 、 、 、 6級記錄CPE程度。同時設病毒對照、陽性對照、病毒唑藥液對照、桂枝湯藥液對照、正常細胞對照。待病毒對照孔的CPE達（ ～ ）時，進行中性紅染色，以酶標儀在570nm下測定各孔的OD值，OD值均以x±s表示，進行組間t檢驗。求出各組細胞病變均值（CPE均值）、活細胞率。結果：桂枝湯及病毒唑藥液對HSV-Ⅰ致細胞病變的影響：桂枝湯藥液2～8mg/ml及病毒唑藥液32～125μg/ml組的CPE均值明顯低於病毒對照組，桂枝湯藥液0.5～8mg/ml及病毒唑藥液16μg～125μg /ml組的OD值、活細胞率明顯高於病毒對照組，表明桂枝湯及病毒唑藥液本身對HSV-Ⅰ的致細胞病變有延緩作用。單次給予桂枝湯後大鼠血清對HSV-Ⅰ致CPE的影響：正常血清以及給予2個劑量桂枝湯後0.5～12h內8個時間點采集的血清，其CPE均值均顯著低於病毒對照組，OD值明顯高於病毒對照組；與正常血清相比，除5g/kg劑量組的0.5h外，其餘各組的OD值均明顯高於正常血清組；給予2個劑量桂枝湯後4h采集的血清OD值。陽性對照藥病毒唑給大鼠口飼後1h、2h采集的血清，其CPE均值均顯著低於病毒對照組，OD值顯著高於病毒對照組，並且lh采集的血清與正常血清相比亦有顯著差異。兩次給予桂枝湯後的大鼠血清對HSV-Ⅰ致CPE的影響：大鼠連續2次（間隔1h）灌胃給予桂枝湯5g/kg、10g/kg後，2個劑量各8個時間點血清組的OD值均明顯高於病毒對照組，0.5h的OD值；桂枝湯5g/kg的0.5h、1h、4h、8h及10g/kg的0.5h、1h、3h的OD值與病毒唑對照組相比有顯著差異。本實驗觀察含藥血清對HSV-Ⅰ致CPE的影響，同時進行桂枝湯藥液抗HSV-Ⅰ實驗。經多次實驗重復，桂枝湯藥液對HSV-Ⅰ致CPE有延緩作用。而含藥血清單次給藥、兩次給藥後的各8個時間點的OD值均明顯高於病毒對照組，有明顯差異。單次給藥，兩個劑量組的藥後4h的血清的OD值，兩次給藥後的0.5h血清的OD值。正常大鼠血清組的OD值亦高於病毒對照組，但低於給藥組。表明含藥血清的作用強於正常血清。陽性對照藥病毒 0.07g/kg給予大鼠，無論是單次給藥，還是兩次給藥，藥後1h組OD值均高於病毒對照組。\\[34\\]

在此次實驗基礎上進一步對血清滅活前後對HSV-Ⅰ致CPE的影響進行了比較研究，結果：①正常大鼠血清未滅活前對HSV-Ⅰ致細胞病變有抑制作用，但經56℃30min滅活後，其作用降低，單次給藥降低幅度較小（可能是動物數較少的緣故），兩次給藥降低幅度較大，即使降低幅度大，其OD值仍高於病毒對照組。②2次給藥後的0.5～1h的效應增加率較高，單次給藥的4～8h的效應增加率較高，似乎兩次給藥比單次給藥的血清對HSV-Ⅰ致CPE作用的起效時間前移，單次給藥比兩次給藥藥效的維持時間延長。③無論是單次，還是兩次給藥後2～12h采集的血清，滅活後的OD值比未滅活者均有所降低，但仍顯著高於病毒對照組、正常血清對照組。④從理論上推測，含藥血清（總體的）包含著含藥血清（真正的藥物）與正常血清，其藥效作用也必然包含著這兩部分血清的作用。因此提出計算含藥血清的效應增加率，試圖排除血清本身的作用對實驗的干擾，可較為準確地評價含藥血清（真正的藥物）的作用。\\[35\\]

用健康雄性大耳白兔制備含藥血清進行更進一步的研究：白兔6～8隻，體重2.5～3.0kg，購自中國醫學科學院動物研究所；每次每隻按2.3g（飲片）/kg體重灌胃給藥，根據實驗要求每日1次、多次或多日連續給藥。1日內多次給藥時每次間隔3h，於末次給藥後0.5～9h耳中央動脈采血，分離血清。正常血清1日給藥時在給藥前同體采血，若多日給藥則另投1組在同等條件下灌胃蒸餾水。各血清經1 ∶4稀釋後用於實驗。血清對病毒致細胞病變作用的影響：取已長成單層的Hep-2細胞板，用100TCID50的副流感病毒攻擊，1h棄去病毒液，加相應的血清100μl/孔，同時設病毒對照組和細胞對照組。結果按6級分類標準判斷。當病毒對照組結果為 時記錄實驗結果。細胞病變程度按以下方式轉換為數字表示0（－）、0.5（±）、1（ ）、2（ ）、3（ ）、4（ ），相對細胞病變數=Σ（孔數×轉換後數字）/總孔數。細胞存活率的測定采用中性紅染料吸收法。步驟：當病毒對照組的細胞病變為 至 時，將培養板內液體棄去，每孔加5mg/ml的中性紅染料100μl，置37℃，5%的CO2培養箱中孵育2h，棄去染液，用生理鹽水洗細胞面2次，加脫色劑每孔100μl，置室溫下放置10min，立即置酶標儀下測其OD值。細胞存活率按以下公式計算：細胞存活率%=實驗組（病毒組）OD值/細胞對照組OD值。結果采用t檢驗進行統計學處理。結果顯示：正常血清組細胞存活率有高於病毒對照組的趨勢；含藥血清組細胞存活率與病毒對照組比較無顯著性差異。因此，在實驗中評價含藥血清的藥效，應充分考慮到正常血清的作用。各實驗組應與正常血清進行比較，以便排除其對實驗結果的干擾。桂枝湯單次給藥後采集的含藥血清，經1 ∶4稀釋後用於體外抗病毒實驗，與正常血清比較無抑制病毒致細胞病變的作用，可見單次給藥這種方式所制備的含藥血清不能反映藥效，需進一步改進。將單次給藥的給藥天數增加，即每日1次給藥連續2天或連續3天，各時間點的含藥血清與正常血清比較時，分別表現為4～5h和2h采集的血清有明顯抑制病毒致細胞病變的作用。可見在單次給藥不能反映藥效的基礎上增加給藥天數可反映出有效的時間點，突出含藥血清本身的藥效，優於單次給藥方式；如果增加給藥次數，即1日內重復給藥2次或3次，結果：1日內2次給藥後采集的含藥血清與正常血清比較，在5～7h有明顯抑制病毒致細胞病變的作用，重復2次給藥連續2天的含藥血清與正常血清比較在1～6h有顯著抑制病毒致細胞病變的作用。歸納可得：①單次給藥不能突出含藥血清的藥效，若增加給藥天數可反映有效時間點，故多日給藥優於1日給藥；②增加1日內給藥次數也可反映出有效時間點，故多次給藥優於單次給藥。③在1日給藥次數相同的基礎上，隨著給藥天數增加起效時間提前。④增加給藥次數後再多日給藥，不僅起效時間提前，而且藥效維持時間延長，容易掌握有效的時間點，這樣從總體上講多日多次給藥可能是更好的給藥方式。但這一規律有一定的限度，當一日內重復給藥3次或重復2次給藥連續3天時，此時的含藥血清不僅不表現出抑制病毒致細胞病變的作用，反而對培養細胞有明顯的“毒性”作用，表現為細胞生長受抑制、細胞退變、存活率降低、細胞病變不典型，從而無法判斷結果。\\[36\\]

（五）鎮痛、鎮靜作用

鎮痛實驗結果表明，在120min時，37.5%、75%桂枝湯使小鼠基礎痛閾分別增高64.82%和105.35%，與0.1%嗎啡（20mg/kg）的作用相近；75%桂枝湯對小鼠扭體反應的抑制率為90%。實驗還表明，桂枝湯能抑制小鼠自由活動，增強巴比妥類藥物的催眠作用。\\[1，2，7\\]對於醋酸扭體法，本方合煎的ED50為24.72g/kg，而分煎則為33.7g/kg，說明合煎的鎮痛作用強於分煎。\\[26\\]對桂枝湯、桂枝加芍藥湯、桂枝加桂湯和桂枝去芍藥湯4方進行作用比較，發現前3者對醋酸引起的扭體反應發生率均有明顯抑制作用，而以桂枝加芍藥湯為強；對於戊巴比妥鈉閾下劑量，桂枝加桂湯、桂枝湯均能促進入睡率的提高，對催眠劑量，兩方均能延長睡眠時間，並且兩方均呈明顯的量效關繫。\\[37\\]研究表明，脕腹疼痛的發生，與某些中樞神經遞質，如乙酰膽堿、5-HT、P物質、Na離子、K離子、Ca離子等濃度的升高有關，而桂枝湯可明顯降低諸致病物質的濃度，提高痛閾值，而起到解痙和止痛作用。\\[30\\]

（六）對呼吸繫統的影響

有實驗表明本方可使氨水所致的小鼠咳嗽潛伏期明顯延長，咳嗽次數明顯減少；肺髒和酚紅排出增加，有明顯祛痰作用，對蟾蜍口腔黏膜上皮纖毛運動有保護作用，但本方無擴張小鼠支氣管及抗支氣管收縮劑的作用，故無平喘作用。\\[3\\]另有實驗於小鼠給藥後1h用恆壓下噴霧氨水致咳，測定引起半數小鼠咳嗽的時間（EDT50），計算鎮咳強度R值。在中劑量時，桂枝湯的EDT50為28.8s，R值為136%；桂枝加厚樸杏子湯分別為36.1s和171%。兩者均有鎮咳作用，而桂枝加厚樸杏子湯的作用強於桂枝湯。用酚紅法測定小鼠藥後1h的祛痰能力，在中劑量時，桂枝湯的酚紅排出量為1.42±0.42μg/ml，桂枝加厚樸杏子湯為1.91±0.68μg/ml，比對照組（0.85±0.35μg/ml）均有顯著增加（P＜0.01），二方均呈量效依賴關繫，而桂枝加厚樸杏子湯的祛痰作用又強於桂枝湯。用0.5%磷酸組織胺引起豚鼠哮喘，測定藥後1h的哮喘發生率，發現桂枝湯僅在大劑量下能顯著降低哮喘發生率，桂枝加厚樸杏子湯在大、中劑量時則可完全抑制哮喘的發生，提示其平喘作用強於桂枝湯。\\[38\\]

對於過敏性鼻炎的作用及機制研究方面，有人觀察桂枝湯治療過敏性鼻炎的作用。采用卵蛋白（OVA）作為致敏原誘發豚鼠制備過敏性鼻炎模型，以鼻癢、噴嚏及流清涕等行為學指標，組織學觀察及血清HAIgE生化指標考察桂枝湯治療過敏性鼻炎的作用。結果顯示桂枝湯高、中劑量組癥狀積分明顯低於模型組（P＜0.01），與辛芩顆粒對照組相當;血清組胺和IgE含量明顯低於模型組（P＜0.01，P＜0.05）;組織學觀察可見由於纖維修復所致組織結構重建，黏膜增厚，炎性細胞浸潤減少，間質無水腫。認為桂枝湯具有治療過敏性鼻炎的作用。\\[39\\]

有人研究桂枝湯治療過敏性鼻炎的作用機制。
采用卵蛋白（OVA）作為致敏原誘發豚鼠制備過敏性鼻炎模型，以免疫組化法和酶聯免疫法檢測模型豚鼠T淋巴細胞亞群（CD4、CD8）的狀態，血清Th1/Th2的代表因子IL-4、IL-5和TNF-的水平，考察桂枝湯對T亞群及相關細胞因子的影響。結果顯示桂枝湯高劑量組CD4/CD8明顯高於模型組（P＜0.05）;桂枝湯高、中劑量組血清IL-4、IL-5和TNF-α的水平明顯低於模型組（P＜0.01，P＜0.05）。認為桂枝湯治療過敏性鼻炎的作用與其調節CD4/CD8平衡及血清IL-4、IL-5和TNF-α水平有關。\\[40\\]

另有研究通過觀察桂枝湯對嗜酸性粒細胞（EOS）的影響探討其治療過敏性鼻炎的作用機制。采用卵蛋白（OVA）作為致敏原誘發豚鼠制備過敏性鼻炎模型，血塗片觀察EOS數，以酶聯免疫法和原位雜交法檢測嗜酸性粒細胞趨化因子（Eotaxin）嗜酸性粒細胞陽離子（ECP）的水平，考察桂枝湯對EOS及相關細胞因子的影響。結果顯示桂枝湯高、中劑量組EOS明顯低於模型組（P＜0.01，P＜0.05）;桂枝湯高、中劑量組鼻灌洗液ECP水平和鼻黏膜Eotaxin陽性率亦明顯低於模型組（P＜0.01，P＜0.05）。認為桂枝湯治療過敏性鼻炎的作用與其通過降低Eotaxin和ECP水平抑制EOS的聚集和活化有關。\\[41\\]

（七）對消化繫統的作用

1.對腸蠕動的雙向調節桂枝湯的3個不同劑量組對正常小鼠腸蠕動無明顯影響。\\[42\\]桂枝湯對正常小鼠的腸蠕動未見有規律性影響。桂枝去芍藥、桂枝加桂湯和桂枝加芍藥湯也無明顯作用。但上述4方均能明顯對抗新斯的明引起的小鼠腸蠕動亢進，並呈明顯量效關繫。\\[37\\]以新斯的明靜注小鼠引起的腸蠕動亢進為例，給予桂枝湯能顯著抑制腸蠕動的亢進。腎上腺素能使小鼠腸蠕動抑制，給予桂枝湯能使受抑的腸蠕動活動增強，恢復到接近正常水平。\\[7\\]

2.對胃排空、腸推進作用的影響\\[43\\]

（1）對酚紅胃排空、腸推進的影響酚紅標準曲線的制作參照文獻方法。

結果：阿托品可顯著抑制胃酚紅排空（P＜0.01），桂枝湯則可改善這一抑制作用，調節胃的排空趨於正常水平，並呈一定的量效趨勢，但無顯著性意義（r=0.9929，P＞0.05），低劑量桂枝湯這一作用不明顯。

（2）對小腸炭末推進的影響小鼠90隻隨機分成9組，空白對照組（Con）灌服蒸餾水（W），靜注生理鹽水（NS）；新斯的明組（Neo）灌服W，靜注Neo（0.08mg/kg，下同）；阿托品組（Atr）灌注W，靜注Atr（5mg/kg，下同）；高桂 新斯的明組（HG Neo）灌服高劑量桂枝湯，靜注Neo；高桂 阿托品組（HG Atr）灌服高劑量桂枝湯，靜注Atr；中桂 新斯的明組（MG Neo）灌服中劑量桂枝湯，靜注Neo；中桂 阿托品組（MG Atr）灌服中劑量桂枝湯，靜注Atr；低桂 新斯的明組（LG Neo）灌服低劑量桂枝湯，靜注Neo；低桂 阿托品組（LG Atr）灌服低劑量桂枝湯，靜注Atr。小鼠供飲禁食24h後，灌服各組藥物20ml/kg，半小時後靜注實驗藥物，靜注30min後灌注活性炭液20ml/kg，再隔20min將小鼠脫臼處死，取出腸管，迅速度量幽門至回盲部炭末前沿的距離，求出炭末推進百分率。結果：阿托品可顯著（P＜0.01）減慢炭末的推進速度，桂枝湯則可調節這一減慢的作用，並使之趨於正常（P＞0.05），各劑量之間呈明顯的量效關繫（r=0.9976，P＜0.05）。新斯的明可明顯加快炭末推進（P＜0.01），桂枝湯則可調節其推進速度使之趨於正常水平（P＞0.05），劑量之間無明顯的量效關繫。（r=0.9933，P＞0.05）。

（3）對阿托品致小腸推動減慢模型的影響Atr能顯著減慢酚紅在小腸中的推進速度，從第1段到第3段酚紅相對百分率明顯高於Con組，酚紅主要集中在第2段和第3段，占小腸酚紅總量的55.89%，而在第4段、第5段濃度較低，桂枝湯則可明顯改善這一抑制狀態。HG Atr組其相對百分率在第2段則明顯低於Atr組（P＜0.01），而在第4段則正好相反。MG Atr組也有同樣的變化趨勢。該兩濃度組與Con組比較則無明顯差別（P＞0.05）。

（4）對新斯的明模型小腸推進的影響Neo可明顯加快酚紅在小腸中的推進，酚紅主要集中在第4段和第5段，占小腸酚紅總量的66.33%。而Con組、HG Neo組、MG Neo組僅分別占48.39%、42.15%、53.95%；在第2段、第3段酚紅量，Neo組則明顯低於Con組、HG Neo組，該3組的酚紅占有量分別為23.28%、40.22%、46.38%。結果表明Neo加速小腸酚紅往下端推進，而藥物可調節這一加快的速度，使之趨向正常。灌服Atr可顯著抵消Neo這一作用，使酚紅在腸中的推進速度趨於正常（P＞0.05），而與Neo組卻有極其顯著差異（P＜0.01）。

（5）對正常小鼠腸酚紅推進的影響桂枝湯對正常小鼠腸酚紅推進相對百分率無明顯影響。

（6）對腸蠕動的雙相作用小鼠接受新斯的明以後，能引起腸蠕動亢進，0.5h內使腸道推進作用提高46.6%。靜注新斯的明前50min，一次口飼桂枝湯，3種不同劑量均能顯著抑制腸蠕動的亢進，腸內容物推進長度比值較新斯的明組分別降低16%和24%。小鼠接受腎上腺素，可明顯抑制正常的腸蠕動，0.5h內腸內容物推進長度比值較正常小鼠降低22%。給腎上腺素前50min，一次給動物口飼桂枝湯，3種不同劑量均能使受抑制的腸蠕動活動增強，接近正常水平，腸內容物推進長度比值與正常組相比已無顯著差異。桂枝湯的3個不同劑量組對正常小鼠的腸蠕動，無明顯影響。

3.對胃動素、胃泌素含量的影響\\[44\\]

桂枝湯對胃動素的影響：阿托品性胃腸運動受抑大鼠的血漿、下丘腦、胃、十二指腸、空腸的胃動素含量明顯降低，與對照組比較有顯著差異（P＜0.01或P＜0.05）；高、中劑量的桂枝湯則可調節胃動素的含量，使其趨於正常；桂枝湯對下丘腦組織中的胃動素含量呈量效相關（r=0.9970，P＜0.05），即高劑量桂枝湯作用較強，而低劑量則較弱。其他組織也有一定趨勢，但相關性檢驗無統計學意義（P＞0.05）。新斯的明性胃腸運動亢進大鼠的血漿、下丘腦、胃、十二指腸、空腸的胃動素含量升高，與對照組比較有顯著差異（P＜0.01或P＜0.05）；高劑量桂枝湯可使胃動素的含量趨向正常；但中、低劑量桂枝湯對胃組織中的胃動素含量無明顯影響。桂枝湯對正常大鼠組織胃動素含量無明顯影響。

桂枝湯對胃泌素的影響：大鼠血漿、下丘腦、胃、十二指腸、空腸均含有一定量的胃泌素，以下丘腦和十二指腸中含量略高。阿托品性胃腸運動受抑大鼠的血漿和上述組織中的胃泌素含量明顯降低，桂枝湯可使胃泌素含量升高，並趨於正常，藥物劑量間有一定的量效趨勢，但經相關性檢驗無統計學意義（P＞0.05）。新斯的明性胃腸運動亢進大鼠血漿、下丘腦、胃、十二指腸、空腸的胃泌素含量明顯升高，在下丘腦升高更為明顯，與正常對照組比較有顯著差異（P＜0.01或P＜0.05），桂枝湯則可調節胃泌素這一含量變化，使其趨於正常，藥物劑量間有一定的量效趨勢，但經相關性檢驗無統計學意義（P＞0.05）。桂枝湯對正常大鼠組織中的胃泌素含量無明顯影響（P＞0.05）。

4.對P物質含量影響\\[45\\]

桂枝湯對阿托品性胃腸運動受抑大鼠SP含量的影響：除胃竇外，阿托品性胃腸運動受抑大鼠，血漿、下丘腦、十二指腸、空腸SP含量均明顯降低（與正常組比較，P＜0.05或P＜0.01）；桂枝湯可使上述組織和血液中的SP含量明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），並趨於正常；除胃竇外，藥物劑量間有一定的量效相關趨勢，但經相關性檢驗無統計學意義（P＞0.05）。桂枝湯對新斯的明性胃腸運動亢進大鼠SP含量的影響：除胃竇外，新斯的明性胃腸運動亢進大鼠血漿、下丘腦、十二指腸、空腸SP含量均明顯升高（與正常組比較，P＜0.05或P＜0.01），桂枝湯則使其明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），並趨於正常；用口服阿托品進行處理，可使新斯的明性大鼠血液和組織中SP含量明顯降低，並趨於正常水平。3種劑量的桂枝湯對正常大鼠血液、下丘腦和胃腸組織SP含量無明顯影響。

桂枝湯對阿托品性胃腸運動受抑大鼠生長抑素含量的影響\\[